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目的:在模拟脊髓损伤微环境下观察db-cAMP和Taxol联合应用对新生SD大鼠背根神经节神经元轴突再生的影响。方法:(1)成年雌性SD大鼠采用Allen的改良方法制作截瘫模型:实验随机分组:手术组7只、假手术对照组7只、对照组7只;根据改良Allen方法制作T9完全性截瘫SD大鼠模型,1w后取T8~T10节段脊髓并分离、过滤形成组织匀浆并制备脊髓提取液;(2)使用新生SD大鼠并取背根神经节然后行神经元分离、培养和鉴定;(3)实验1:分组培养2d,采用免疫荧光染色技术,并测量轴突生长平均长度和轴突远端平均微管荧光密度,最后观察完全性截瘫SD大鼠脊髓提取液对轴突生长是否有影响(A组,50μl手术组脊髓提取液+DRGNs;B组,50μl假手术组脊髓提取液+DRGNs;C组,50μl对照组大鼠脊髓提取液+DRGNs;D组,50μl PBS+DRGNs)。实验2:分组培养1d、2d,采用免疫荧光染色技术,并测量轴突生长平均长度和轴突远端平均微管荧光密度,最后观察在模拟脊髓损伤微环境下db-cAMP、Taxol分别与联合应用对轴突生长是否会产生影响(A组,50μM db-cAMP+2n M Taxol+50μl完全性截瘫大鼠脊髓提取液+DRGNs;B组,50μM db-cAMP+50μl完全性截瘫大鼠脊髓提取液+DRGNs;C组,2n M Taxol+50μl完全性截瘫大鼠脊髓提取液+DRGNs;D组,50μl完全性截瘫大鼠脊髓提取液+DRGNs;E组,50μl PBS+DRGNs)。结果:(1)实验1:共同培养2d后,轴突生长平均长度,A组为47.7±3.2μm,B组为144.1±3.7μm,C组为137.1±3.8μm,D组为142.7±5.5μm。单因素方差分析示:A组与B、C、D组之间,P<0.01,有显著统计学差异。轴突远端平均微管荧光密度,A组为65.1±1.5AFU/μm,B组为195.2±2.4AFU/μm,C组为195.4±2.5AFU/μm,D组为175.1±2.9AFU/μm。A组与B、C、D组之间,P<0.01,有显著统计学差异。(2)实验2:共同培养1d后,轴突平均长度,A组为168.3±4.7μm,B组为157.2±4.3μm,C组为135.2±4.8μm,D组为47.3±4.2μm,E组为136.8±4.3μm。单因素方差分析示:D组与A、B、C和E组之间,P<0.01,有显著统计学差异。2d后,轴突平均长度,A组为174.8±3.2μm,B组为165.2±3.4μm,C组为143.5±3.8μm,D组为44.2±2.5μm,E组为142.6±1.8μm。单因素方差分析示:D组与A、B、C和E组之间,P<0.01,有显著统计学差异。C组与A和B组之间,P<0.05,有显著统计学差异。A组与B、C、D和E组之间,P<0.01,有显著统计学差异;C组与E组之间,P>0.05,两者无统计学差异;C组与B组之间,P<0.01,有显著统计学差异。轴突远端平均微管荧光密度,A组为384.6±3.2AFU/μm,B组为364.3±2.9AFU/μm,C组为202.1±2.2AFU/μm,D组为60.7±2.8AFU/μm,E组为180.9±3.3AFU/μm。D组与A、B、C、和E组之间,P<0.01,有显著统计学差异。A组与B、C、D和E组之间,P<0.01,有显著统计学差异;C组与B组之间,P<0.01,有显著统计学差异。结论:(1)完全性截瘫大鼠脊髓提取液对新生SD大鼠DRGNs轴突生长有抑制作用,通过前期实验结果,也表明完全性截瘫大鼠脊髓提取液可模拟脊髓损伤的微环境,抑制新生SD大鼠DRGNs轴突再生;(2)单独应用适合剂量的db-cAMP和Taxol能促进轴突再生,生长锥形成。联合应用db-cAMP和Taxol对新生大鼠DRGNs轴突生长促进作用比单一应用更为明显,形成多个分支、甚至神经网,生长锥更加粗大。