项目组前期研究发现,雷公藤红素抑制TLR4/NF-κB信号途径,与逆转软脂酸导致的人肝细胞胰岛素抵抗密切相关。本研究用生物信息学和细胞学技术,进一步研究雷公藤红素在TLR4/NF-κB信号途径上作用靶点。有以下两点发现:1.雷公藤红素抑制TLR4/NF-κB途径上关键信号分子IRAK4活化。首先,文本挖掘技术预测IRAKs是雷公藤红素靶点之一;其次,用分子对接技术发现,雷公藤红素能与IRAK4结合,且该结合位点也是ATP结合位点,提示雷公藤红素可能竞争结合ATP,阻断IRAK4活化;第三,软脂酸能够活化IRAK1和IRAK4,而雷公藤红素能抑制两者活化;最后,用siRNA干扰技术抑制IRAK4或IRAK1表达,能有效阻断软脂酸活化NF-κB。2.雷公藤红素抑制TLR4/NF-κB活化,可能与阻断软脂酸与MD2蛋白结合有关。首先,分子对接表明软脂酸能进入MD2疏水性口袋;其次,分子对接技术显示雷公藤红素同样能进入该口袋,且与蛋白结合基团多于软脂酸;最后,siRNA干扰MD2表达能有效阻断软脂酸活化NF-κB。综上所述,本研究首次发现,阻断IRAK4活化以及限制软脂酸进入MD2,可能是雷公藤红素抑制软脂酸活化TLR4/NF-κB的作用机制。本研究进一步揭示了雷公藤红素逆转软脂酸导致胰岛素抵抗的分子靶点。