【摘 要】
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目的:严重创面损伤所导致的慢性不愈合伤口是一种严重的并发症,由于皮肤微血管受损,炎症细胞聚集且作用时间较长,容易威胁患者生命安全。因此,迫切需要具有突出功能的伤口修复新型创面敷料。可通过静电纺丝技术制备复合结构纳米纤维支架,由于其优越的仿生性能和生物相容性,已广泛应用于再生修复领域。方法:1.利用静电纺丝、纳米纱线及静电喷雾技术,制备多层级纳米纤维支架。聚己内酯(PCL)涂层梯度表皮生长因子(EG
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目的:严重创面损伤所导致的慢性不愈合伤口是一种严重的并发症,由于皮肤微血管受损,炎症细胞聚集且作用时间较长,容易威胁患者生命安全。因此,迫切需要具有突出功能的伤口修复新型创面敷料。可通过静电纺丝技术制备复合结构纳米纤维支架,由于其优越的仿生性能和生物相容性,已广泛应用于再生修复领域。方法:1.利用静电纺丝、纳米纱线及静电喷雾技术,制备多层级纳米纤维支架。聚己内酯(PCL)涂层梯度表皮生长因子(EGF)的向心取向纳米纤维支架作为上层;明胶(Gel)与甲基丙烯酰化壳聚糖(CSMA)无规纳米纤维支架作为中层;明胶与纱线PCL涂层均一脱细胞真皮基质(ADM)的网状拓扑支架作为下层。2.为研究向心取向支架提供的拓扑信号与活性因子所提供的生化信号对表皮修复的而影响,本研究通过CCK-8及细胞迁移实验来评估涂层梯度EGF的向心取向纳米纤维支架对表皮细胞迁移和增殖作用。3.为研究创面敷料具备的抗菌性能,本研究通过琼脂板扩散实验及细胞毒性实验来检验加入CSMA的中层支架对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的抗菌性能。4.为研究网状拓扑结构及ADM生化信号对脂肪干细胞调节作用,本研究通过收集条件培养基来评估调控脂肪干细胞(ADSC)旁分泌对成纤维细胞迁移影响。结果:1.三层多层级支架分别针对不同皮肤层次修复的仿生特性,向心取向的纳米纤维支架成功涂层梯度EGF;通过光交联CSMA成功负载明胶纳米纤维支架;纱线技术和光焊技术成功制备网状支架并夹杂明胶短纤维涂层ADM活性蛋白。2.涂层梯度的向心取向纳米纤维支架对表皮细胞增殖及迁移速度要明显高于对照组及向心取向纳米支架。3.抗菌性检测(抗菌圈大小):Gel/CSMA>Gel。负载CSMA的明胶纳米纤维支架细胞增殖与其他组无显著性差异(P>0.05)。4.模拟创面愈合实时状态,涂层ADM的网状拓扑支架所调控的脂肪干细胞旁分泌对成纤维细胞的迁移要快于其他各组。结论:该研究证明了所设计的不同拓扑结构的三层支架,并对上层和下层进行生物功能化。评测三层支架在创面愈合中所发挥的不同性能,上层支架对表皮细胞的迁移和增殖具有明显的效果;中层支架具有抗菌性能;下层支架负载ADSC调控成纤维细胞的迁移具有促进作用。在进一步完善了拓扑结构与生物功能化相互作用,为指导辅助分泌信号网络来开发支架材料以促进组织再生与修复奠定了基础。
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