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目的了解安徽医科大学第一附属医院临床分离鲍曼不动杆菌对临床常用抗生素的耐药性和碳青霉烯酶产生情况,以及了解鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶基因型,尤其是OXA型碳青霉烯酶基因的分布情况。指导临床合理使用抗生素,减轻耐药给临床治疗带来的选择性压力;检测耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌的同源性,分析耐药株在医院内感染的分子流行病学特征,指导临床有效控制耐药株在医院内的传播。材料与方法收集安徽医科大学第一附属医院2006年10月至2008年09月临床分离鲍曼不动杆菌141株;采用琼脂稀释法测定141株鲍曼不动杆菌对14种抗生素的最低抑菌浓度,改良Hodge试验对耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶(OXA酶)进行表型检测;PCR方法对141株鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶基因进行筛查,对碳青霉烯酶全编码基因进行克隆测序分析。采用转移接合试验和质粒DNA的检测了解碳青霉烯酶基因是否具有可转移性;ERIC-PCR分析携带D类碳青霉烯酶(OXA)基因鲍曼不动杆菌的同源性,脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析2008年安徽医科大学第一附院临床分离耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌的同源性。结果141株鲍曼不动杆菌对哌拉西林的耐药率为93.3%,头孢曲松、头孢他啶和头孢吡肟分别为89.6%、87.3%和81.3%,头孢哌酮/舒巴坦为44.0%,左氧氟沙星为88.1%,加替沙星为49.3%。亚胺培南和美罗培南分别为34.3%和41.0%。资料显示鲍曼不动杆菌的耐药现象较严重。碳青霉烯酶(OXA酶)表型检测结果显示60株耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌检测出阳性37株。141株鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶基因筛查结果为:CTX-M-1-like阳性2株,CTX-M-14-like阳性5株,TEM阳性79株,SHV阳性3株,blaOXA-23阳性3株,ISAba1-blaOXA-23阳性39株,blaOXA-58阳性3株,blaOXA-66阳性85株。碳青霉烯酶表型检测阳性的37株鲍曼不动杆菌基因检测结果为:blaOXA-23阳性31株,blaOXA-58阳性2株,blaOXA-66阳性4株。全编码基因TA克隆测序结果分析显示:blaOXA-23和blaOXA-66未见突变,1株blaOXA-58发现突变,突变点位于第14位碱基处,A变为G,相应Phe变为Ser,其余两株无突变。转移接合试验结果为: 42株blaOXA-23全部位于染色体上,1株blaOXA-58位于质粒上, 2株位于染色体。出现突变的blaOXA-58位于质粒上。ERIC-PCR结果显示:携带OXA-23基因的42株鲍曼不动杆菌分为6个型,分别用A、B、C、D、E、F表示,属于同一型有34株,具有亲缘关系的总共有38株,其余4株分别属于其他两个型,这两个型之间也存在着亲缘关系。3株blaOXA-58阳性鲍曼不动杆菌不具有同源性。PFGE分析结果显示:2008年安徽医科大学第一附院临床分离的20株耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌分为5个型其中包括2个亚型,总共有12株属于同一型。结论鲍曼不动杆菌多药耐药现象严重,对头孢菌素类等多种抗生素呈高度耐药,对碳青霉烯类药物耐药率亦较高呈逐年升高趋势;产碳青霉烯酶(OXA酶)是鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药的主要机制之一;鲍曼不动杆菌具有较高的β-内酰胺酶基因携带率,基因型分别以TEM、blaOXA-23和blaOXA-66为主,其中ISAba1是blaOXA-23的启动序列;基因型检测证实本院临床分离鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类耐药机制主要是产OXA-23型酶;blaOXA-23位于染色体,携带blaOXA-23鲍曼不动杆菌存在高度同源性, PFGE分析结果提示耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌也存在较高的同源性。提示耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌存在医院内克隆株传播。