被誉为―高原人参‖的红景天,具有抗缺氧、抗氧化、抗疲劳、抗血乳酸含量增加、保肝等作用。其主要活性成分红景天苷具有保护神经及心血管系统、保肝护肝、调节机体代谢、增加机体免疫系统功能以及干预衰老等多种药理作用。其中红景天苷的抗氧化作用己被证实,但有关红景天苷对小鼠肝损伤的保护是否通过抗氧化作用,目前尚无人报道。本研究将红景天苷作用于四氯化碳肝损伤造模小鼠,并对其保肝效果以及抗氧化保肝机制进行研究,以期开发一种天然抗氧化保肝药物。本试验分为空白组、模型组、红景天苷组、红景天苷预防组和甘草酸二铵注射液预防组。以60 mg/kg红景天苷连续腹腔注射小鼠14 d,然后腹腔给予10 mL/kg 1%CCl₄油溶液诱导小鼠肝损伤,24 h后麻醉处死。11.25 mg/kg甘草酸二铵注射液作为阳性药物。通过小鼠体重和肝脏指数的比较,初步观察肝脏的病变情况;观察肝组织病理切片、测定血清转氨酶水平,初步判定红景天苷的保肝效果。此外,通过观察肝脏的超微结构,测定MMP的情况来观察线粒体的结构与功能的完整性,测定肝脏ROS水平来观察氧化应激的水平,测定肝匀浆基本生化指标来观察小鼠体内抗氧化体系是否被ROS打破,进一步探究红景天苷的抗氧化保肝作用。最后,采用实时荧光定量来测定MAPK的各分支通路的主要下游基因Gadd45a、Mapk7、Rras2的mRNA表达情况,采用免疫组化方法半定位的测定相应功能蛋白Gadd45a、Rras2的表达情况,从基本分子机制证明红景天苷的抗氧化保肝作用。研究结果如下:1红景天苷对CCl₄诱导小鼠急性肝损伤的保肝效果初探结果表明,各组间肝指数无显著差异。空白组和红景天苷组肝脏正常,呈红褐色,表面光亮,质地柔软。模型组外观肝脏体积稍有增大,包膜紧张,边缘钝圆,表面光泽度下降,可见明显黄褐色花斑,整体呈黄褐色。红景天苷预防组小鼠肝脏表面光泽略降低,呈现轻微脂肪变性,情况较模型组显著缓解。甘草酸二铵注射液预防组肝脏略微肿大,肝色暗淡,呈轻微黄褐色,较模型组肝脏状况有改善。病理学观察可见,模型组存在典型病变,超过70%的肝细胞严重脂肪变性,形成大小不同的脂滴空泡,中央静脉周围局灶性坏死,核浓缩、碎裂或溶解,并伴有大量炎性细胞浸润。红景天苷预防组和甘草酸二铵注射液预防组能明显减轻脂肪变性症状,且红景天苷效果更佳。试验对小鼠血清GOT、GPT影响结果显示,与模型组相比,红景天苷预防组酶均显著下降,肝损伤改善良好（P<0.05）;而甘草酸二铵注射液仅降低GPT水平,且效果不如红景天苷。2红景天苷对CCl₄诱导小鼠急性肝损伤的抗氧化保肝作用研究超微结构观察可见,模型组核染色质减少导致核内电子密度降低,细胞器减少,部分细胞质染色较轻。线粒体肿胀,嵴断裂,部分外膜溶解。与模型组相比,甘草酸二铵注射液预防组双层核膜结构清晰完整,部分线粒体嵴断裂,部分内质网扩张,胞质内容物密度介于红景天苷预防组和模型组之间。红景天苷预防组细胞器结构规则,线粒体嵴排列整齐,膜完整,电子密度略低于空白组。MMP和ROS结果显示,模型组MMP明显下降,活性氧显著升高（P<0.05）。红景天苷预防组和甘草酸二铵注射液预防组较模型组,MMP显著升高,活性氧显著减少（P<0.05）。肝生化指标显示,模型组和甘草酸二铵注射液预防组较空白组SOD水平显著降低,红景天苷预防组SOD水平较模型组稍有回升（P<0.05）。红景天苷预处理有效抑制模型引起的CAT下降。红景天苷对GSH的水平恢复也具有良好效果。红景天苷能有效减少MDA生成,效果优于甘草酸二铵注射液。3红景天苷对CCl₄诱导小鼠急性肝损伤的抗氧化保肝作用的基本分子机制研究实时荧光定量PCR和免疫组化结果显示,红景天苷可显著降低MAPK信号通路中氧化应激激活的Gadd45a、Mapk7、Rras2 mRNA的表达,分别是模型组的0.56、0.80和0.49倍。甘草酸二铵注射液预防组未能降低Gadd45a的表达,与空白组差异显著（P<0.05）。Gadd45a阳性蛋白主要在中央静脉周围的肝细胞胞质中表达,模型组Gadd45a高表达,其他各组几乎不表达。Rras2蛋白在模型组和甘草酸二铵注射液预防组中成片表达,其他各组仅少量表达。采用软件对阳性蛋白光密度结果进行统计,模型组使得Gadd45a和Rras2蛋白显著表达,分别高出空白组2.67、3.31倍,而红景天苷使得这些应激蛋白恢复至正常水平。本试验证明,红景天苷能有效抵御CCl₄诱导的小鼠急性肝损伤,保护线粒体功能与结构的完整性,减少ROS产生,调节MAPK通路相关抗氧化基因,达到抗氧化保肝作用,但更深入的具体机制还待进一步研究。