[目的]人体皮肤在防御不利的物理化学因素方面起重要作用。人表皮黑素细胞重要的功能是合成和运输黑色素,黑色素合成和运输过程是受各种因素影响的复杂代谢过程。黑素细胞中存在与黑色素合成相关的酶如酪氨酸酶,酪氨酸酶相关蛋白1(TRP1)和酪氨酸酶相关蛋白2(TRP2);内皮素1(ET1)是角质形成细胞分泌的一种生理活性因子,由21个氨基酸组成。内皮素1(ET1)可以增加黑素细胞树突状突起、促进黑色素合成。内皮素1与黑素细胞内皮素受体(ETBR)结合,可以激活级联信号转导通路,引起胞内钙离子和cAMP浓度升高,蛋白激酶C(Protein Kinase C,PKC)激活,MAPK(mitogen-activated protein kinase)活化;这些胞内事件将导致黑素细胞TYR转录增加,酶活性改变以及细胞增殖。临床实践表明,某些中药具有调节黑素细胞代谢的作用,但相关作用机制尚未阐明。为了探索中药是否可能通过调节黑素细胞内皮素受体(ETBR)的表达,从而影响黑素细胞的代谢,本研究采用体外培养正常人黑素细胞为细胞模型,应用白芷提取物作用于ET1介导的黑素细胞并检测其对黑色素合成相关代谢的影响。　　[方法]体外分离和纯化培养正常人黑素细胞,醇提法提取中药白芷的活性成分,观察白芷提取物对ET1介导的正常人黑素细胞的细胞增殖,酪氨酸酶活性,黑色素生成方面的调节作用,并通过RT-PCR半定量测定白芷提取物对ET1介导的黑素细胞相关酶TYR mRNA表达的影响,利用细胞免疫荧光检测方法观察白芷提取物对于内皮素1介导的黑素细胞ETBR表达的变化。　　[结果]　　1、本研究成功分离及纯化了人黑素细胞,完善了人表皮黑素细胞体外培养条件。　　2、白芷提取液对内皮素1诱导的黑素细胞的增殖有一定的抑制作用;对黑素细胞酪氨酸酶活性有一定的抑制作用;可以降低黑素细胞中的黑色素合成量。尤其是25μg/ml的白芷提取物抑制作用最为明显。白芷提取液可以通过调节黑素细胞的增殖,抑制酪氨酸酶活性、减少黑色素的合成量,从而调节体外培养人表皮黑素细胞的色素代谢。　　3、细胞免疫荧光检测结果显示25μg/ml白芷提取液对10nM的内皮素1诱导的黑素细胞受体(ETBR)的表达具有抑制作用。　　[结论]　　1、成功模仿建立了体外原代培养的人表皮黑素细胞模型。　　2、一定浓度的白芷提取液对内皮素1诱导的黑素细胞的增殖有抑制作用;对黑素细胞的酪氨酸酶活性也有一定的抑制作用;可以降低内皮素1诱导的黑色素的合成量。　　3、白芷提取液可以从基因水平上降低ET1介导的酪氨酸酶基因mRNA的转录。　　4、25μg/ml白芷提取液可以下调内皮素1诱导的黑素细胞内皮素受体(ETBR)的表达。