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目的： 利用MTT法和软琼脂集落法对31种中药单体进行抗肿瘤筛选，并结合巨噬细胞炎症模型对具有抗肿瘤的中药单体进行体外抗炎研究，明确具有抗炎作用的抗肿瘤中药单体，并对筛选效果理想的中药单体进行移植瘤裸鼠模型进行体内研究。围绕肿瘤微环境中炎症分子靶点，血管新生分子靶点，凋亡分子靶点，探讨中药单体抗肿瘤作用。 方法： 1.以U87，PANC-1，A375，A549，SK-N-BE(2)，NCI-H2126，Bxpc-3细胞为研究对象，采用MTT对31种中药单体进行抗肿瘤研究，浓度为10-5mol/L，10-6mol/L。 2.以U87，PANC-1，NCI-H2126细胞为研究对象，采用软琼脂集落形成实验，对31种中药单体进行抗肿瘤研究，浓度为10-5mol/L，10-6mol/L。 3.利用巨噬细胞RAW264.7炎症模型，考察中药单体的体外抗炎活性。 4.皮下注射U87，PANC-1，NCI-H2126细胞，制作裸鼠移植瘤模型。成瘤后给予中药单体腹腔注射至14或23天，取瘤称重，取部分瘤组织中性福尔马林固定做免疫组化，其余组织切块液氮速冻，然后转移至-80度冰箱保存。免疫组化检测Ki67，RT-PCR检测瘤组织VEGF，Angiopoietin-1，Angiopoietin-2，VE-cadherin，p53，iNOS，COX-2，IL-1β，TNF-α，IL-6基因表达情况，westernblotting检测瘤组织VEGF，Caspase-3，iNOS，COX-2，IL-1β，IL-6，NF-κBp65蛋白表达情况，Elisa试剂盒检测肿瘤组织中cAMP，cGMP水平。 结果： 1.MTT筛选结果显示：在U87胶质瘤细胞集落体外筛选中，人参皂苷Rg1(10-5mol/L，10-6mol/L)，盐酸小檗碱(10-5mol/L，10-6mol/L)，牛蒡子苷(10-5mol/L，10-6mol/L)，牛蒡子苷元(10-5mol/L，10-6mol/L)，知母皂苷AⅢ(10-5mol/L)，虫草素(10-5mol/L)具有一定的抑制胶质瘤细胞增殖的作用。在PANC-1胰腺癌细胞MTT体外筛选中，盐酸小檗碱(10-5mol/L)，知母皂苷AⅢ(10-5mol/L)，麦角甾苷(10-5mol/L)，淫羊藿次苷Ⅱ(10-5mol/L)具有一定的抑制胰腺癌细胞增殖的作用。在A375黑色素瘤细胞MTT体外筛选中，人参皂苷Rg1(10-5mol/L)，汉防己甲素(10-5mol/L，10-6mol/L)，汉防己乙素(10-5mol/L，10-6mol/L)，红景天苷(10-5mol/L，10-6mol/L)，金丝桃苷(10-5mol/L，10-6mol/L)，牛蒡子苷(10-5mol/L，10-6mol/L)，牛蒡子苷元(10-5mol/L，10-6mol/L)，盐酸小檗碱(10-5mol/L，10-6mol/L)，知母皂苷AⅢ(10-5mol/L，10-6mol/L)，原薯蓣皂苷元(10-5mol/L，10-6mol/L)，补骨脂乙素(10-6mol/L)，蛇床子素(10-6mol/L)具有一定的抑制黑色素瘤细胞增殖的作用。在SK-N-BE(2)神经瘤细胞MTT体外筛选中，盐酸小檗碱(10-5mol/L)，知母皂苷AⅢ(10-5mol/L)具有一定的抑制神经瘤细胞增殖的作用。在A549肺癌细胞MTT体外筛选中，汉防己乙素(10-5mol/L)，人参皂苷Rb3(10-6mol/L)，补骨脂甲素(10-6mol/L)，原薯蓣皂苷元(10-5mol/L)具有一定的抑制肺癌细胞增殖的作用。NCI-H2126肺癌细胞MTT体外筛选中，人参皂苷Rg1(10-5mol/L)，汉防己甲素(10-5mol/L)，红景天苷(10-5mol/L)具有一定的抑制肺癌细胞增殖的作用。在Bxpc-3胰腺癌细胞MTT体外筛选中，知母皂苷AⅢ(10-5mol/L)具有一定的抑制胰腺癌细胞增殖的作用。 2.在U87胶质瘤细胞集落体外筛选中，石吊兰素(10-5mol/L)，盐酸小檗碱(10-5mol/L)，牛蒡子苷元(10-5mol/L)，知母皂苷AⅢ(10-5mol/L)，原薯蓣皂苷元(10-5mol/L)有一定的抑制胶质瘤细胞集落形成。在PANC-1胰腺癌细胞集落体外筛选中，盐酸小檗碱(10-5mol/L)，知母皂苷AⅢ(10-5mol/L)，原薯蓣皂苷元(10-5mol/L)，麦角甾苷(10-5mol/L)，淫羊藿次苷Ⅱ(10-5mol/L)有一定的抑制胰腺癌细胞集落形成。在NCI-H2126肺癌细胞集落体外筛选中，人参皂苷Rg1(10-5mol/L)，红景天苷(10-5mol/L)具有一定的抑制肺癌细胞集落形成。 3.体外抗炎研究显示石吊兰素，盐酸小檗碱，牛蒡子苷元，知母皂苷Ⅲ，淫羊藿次苷Ⅱ在10-5mol/L浓度下具有明显的抗炎作用。 4.在U87移植瘤实验中，与模型组比较，知母皂苷AⅢ(1.0mg/kg)，甲基莲心碱(0.8mg/kg)能抑制肿瘤瘤体积生长，有显著性差异(P<0.05)：免疫组化显示知母皂苷AⅢ，甲基莲心碱能抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05)；在基因转录水平，知母皂苷AⅢ能降低VEGFmRNA(P<0.01)，Angiopoietin-1mRNA(P<0.05)，COX-2mRNA(P<0.01)；在蛋白水平，知母皂苷AⅢ活化Caspase-3，降低VEGF(P<0.05)，COX-2(P<0.05)，NF-κBp65(P<0.05)；升高cAMP。甲基莲心碱能降低VEGFmRNA(P<0.01)，Angiopoietin-2mRNA(P<0.05)，iNOSmRNA(P<0.05)，COX-2mRNA(P<0.01)，IL-6mRNA(P<0.01)，降低VEGF(P<0.05)，iNOS(P<0.05)，COX-2(P<0.05)蛋白。 5.在PANC-1移植瘤实验中，与模型组比较，知母皂苷AⅢ(1.0mg/kg)能抑制肿瘤瘤体积生长，有显著性差异(P<0.05)；免疫组化显示知母皂苷AⅢ能抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05)；在基因转录水平，知母皂苷AⅢ能降低VEGFmRNA(P<0.05)，Angiopoietin-2mRNA(P<0.01)，COX-2mRNA(P<0.01)，IL-1βmRNA(P<0.05)，IL-6mRNA(P<0.01)；在蛋白水平，知母皂苷AⅢ活化Caspase-3，降低VEGF(P<0.05)，COX-2(P<0.05)，IL-1β(P<0.01)，IL-6(P<0.05)，NF-κBp65(P<0.05)蛋白。 6.在NCI-H2126移植瘤实验中，与模型组比较，氨茶碱(0.6mg/kg)能抑制肿瘤瘤体积生长，有显著性差异(P<0.05)；免疫组化显示氨茶碱能抑制肿瘤细胞增殖(P<0.05)；在基因转录水，氨茶碱能降低VE-cadherinmRNA(P<0.01)，COX-2mRNA(P<0.01)。 结论：体内体外研究显示知母皂苷AⅢ有很好的抗脑胶质瘤U87，胰腺癌PANC-1的作用，其抗肿瘤作用与抗血管新生，促进细胞凋亡，抑制部分炎症因子表达及升高第二信使cAMP有关，并且与NF-κCB信号通路相关。而甲基莲心碱在体内研究显示能抑制胶质瘤的U87，其抗肿瘤作用与抗血管新生，抑制部分炎症因子表达有关。