一株产纤维素酶菌株的筛选、鉴定及产酶特性的研究

来源 :长春工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zphym
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纤维素是最为丰富的可再生资源之一,若能将其综合利用于工农业将产生巨大的积极作用,然而纤维素难以降解却使其利用率受到了限制。纤维素降解方面的研究报道在最近已有不少,最经济、环保的方法是通过微生物等产生的纤维素酶来催化降解纤维素。本实验通过以滤纸为唯一碳源的富集培养基对菌源进行富集,通过CMC-Na平板培养基和LB培养基分离纯化得到4株具有产纤维素能力的菌株,通过滤纸崩解和酶活力测定得到一株产酶能力相对较高的菌株KZ-2。该菌能有效的降解纤维素类材料。该菌为革兰氏阴性杆菌,兼性厌氧,经形态学、生理生化特征及16S rRNA序列分析,初步鉴定为肠杆菌(Enterobacter sp.),与其同源性最高的为产气肠杆菌,并为潜在新种。通过单因素试验研究该菌在发酵培养基条件下的培养时间、培养温度、初始pH、初始NaCl浓度对该菌的产酶的影响,试验结果表明该菌在产酶发酵培养基培养5 d产酶量达到最大值,在25-35℃、初始pH 4.5-5.5、NaCl浓度1.0%-2.0%范围内的最佳产酶条件下,CMCA酶活和FPA酶活分别为80.93 U/mL和80.03 U/mL。通过正交实验对产酶条件优化后发酵液中CMCA酶活和FPA酶活分别为108.53 U/mL和82.36U/mL,明显提高了KZ-2产纤维素酶量。通过单因素研究该菌所产的纤维素酶学特性。研究结果表明该菌产的纤维素酶属中性酶,在50℃酶活性最高。金属氯化盐对其具有一定的影响,KCl、FeCl3可以促进酶的活力,CuCl2、ZnCl2对该酶活力有抑制作用,而MgCl2对该酶活力的影响不大。KZ-2菌株所产纤维素酶的这些性质使其在中性纤维素酶的开发过程中提供了良好的运用前景,值得进一步研究。
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