超高压提取金银花等三种药材有效成分的研究

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超高压提取技术是利用100MPa以上的流体静压力作用于溶剂和植物物料的混合液,保压几分钟后卸压,随后进行分离纯化,从而达到提取的目的。超高压提取技术具有提取得率高、耗时短、能耗低、提取液澄清、杂质含量少、常温下操作,保护热不稳定成分的活性、操作简单等优势。本论文在综述了超高压提取技术发展和应用现状的基础上,选取了金银花、光果甘草、皱皮木瓜三种药食同源植物进行了超高压提取的研究,并且通过扫描电镜观察不同提取方法提取前、后,样品组织表观结构、细胞结构的变化,分析超高压对样品中总糖、总蛋白等大分子成分的作用,结合细胞壁透光率的变化研究,对比传统提取方法,推断超高压提取的机理。这对超高压技术在天然产物有效活性成分提取方面的发展有着重要意义。金银花是忍冬科(Caprifoliaceae)植物忍冬Flos Lonicerae japonicae的干躁的花蕾或是带初开的花,药食两用。现代研究证明金银花具有抗炎、抗过敏、抗病毒、保肝等功效。本实验建立了一种超高压提取-HPLC-DAD联合研究金银花质量控制的方法,对金银花中10种活性成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、芦丁、木犀草苷、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸和槲皮素)进行定性定量分析。超高压对金银花最佳提取工艺条件是60%甲醇作为提取溶剂、提取压力400MPa、提取时间3min、料液比1:30(g/mL),在此条件下,10种活性成分总提取率达到57.62mg/g,并且均具有良好的线性关系(r≥0.9997)。这个方法同样成功定量测定了22批不同产地的金银花样品。光果甘草(Glycyrrhiza glabra L.)为豆科甘草属多年生草本植物。目前主要应用于食品、医药、保健、化妆品等领域。光果甘草的主要有效成分为甘草酸等三萜类化合物、光甘草定等黄酮类化合物及甘草多糖等。研究表明,光果甘草具有抗氧化、降血脂、抗动脉粥样硬化、抑菌、抗病毒、抗癌变的作用。本实验采用超高压技术提取光果甘草中甘草酸、光甘草定两种活性成分,考察提取溶剂、压力、时间和料液比对二者提取率的影响,通过正交试验优化得到超高压最佳提取条件为:60%乙醇作为提取溶剂,提取压力500MPa,提取时间3min,料液比1:40(g/mL),光果甘草中甘草酸和光甘草定的提取率分别达到49.84mg/g和1.05mg/g。超高压提取法同超声提取法、热回流提取法进行比较,超高压提取效果明显优于超声提取,同时,超高压提取时间只需1mmin,是超声提取的1/30、热回流提取的1/120。皱皮木瓜(Chaenomeles speciosa (Sweet) Nakai),是蔷薇科木瓜属植物贴梗海棠的果实,是一种药食两用的植物,其主要成分为有机酸、黄酮、萜类、甾醇类化合物。具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、保肝等多种药理活性。本实验利用超高压技术对皱皮木瓜中齐墩果酸和熊果酸同时提取,考察提取溶剂、压力、时间和料液比对二者提取率的影响,优化得到超高压最佳提取条件为:甲醇作为提取溶剂,提取压力500MPa,提取时间5min,料液比1:30(g/mL),齐墩果酸和熊果酸的提取率分别为0.47mg/g和3.66mg/g。本文选取金银花、光果甘草、皱皮木瓜三种植物进行了超高压提取的研究,通过对超高压提取过程中工艺参数的优化,得到了三种植物的最佳提取工艺参数,实验还将超高压提取同传统提取方法做了对比研究。本文对超高压提取技术进行了实际验证,推断了超高压提取的机理,证明了超高压提取技术的优势,为超高压提取技术在天然产物有效成分分离提取中的应用提供了理论依据和技术支持。
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