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目的随着甲状腺疾病发病率的升高,桥本甲状腺炎(Hashimoto thyroiditis,HT)(即瘿病)的中医药治疗需求与日俱增。本研究旨在得出岳仁宋教授治疗桥本甲状腺炎的方药证治规律及核心药物作用的靶点及通路。方法收集2015年-2019年于成都中医药大学附属医院岳仁宋教授处就诊的131例桥本甲状腺炎具有完整四诊资料及处方的病例。将患者四诊资料及处方信息录入EXCEL(2007),建立患者的基础数据库。使用IBM SPSS Modeler 18对用药进行关联规则分析,采用Gephi对药物进行聚类分析、因子分析及复杂网络分析。通过以上方法,发掘出岳仁宋教授处方的内在规律和理法方药。通过数据挖掘研究得出的核心方药开展网络药理学研究。在GENECARDS、Drugbank网站,以“Hashimoto thyroiditis”为关键词检索,得到核心药物的有效成分,利用Pub Med数据库将有效成分转换为靶标基因。利用Cytoscape 3.7.2软件构建化合物-靶点网络,分析化合物和靶标基因间的参数,得到蛋白质相互作用核心网络(protein-protein interaction core network,PPI)。在PPI基础上利用DAVID软件进行GO(Gene Ontology,GO)分析及京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集通路分析,用以描述基因的功能、通路,最终探索出核心药物的治疗靶点。结果1.统计岳仁宋教授治疗桥本甲状腺炎数据:(1)年龄、性别符合HT的流行病学分布;(2)证候:频率分布从高到低为肝郁气滞(42%)、脾肾阳虚(35%)、痰瘀互结(13%)、气阴两虚(10%);(3)症状:频次从高到低依次为失眠或眠差、乏力、便溏、烦躁易怒、便秘、心悸、自汗、口干口渴、咽部不适、颈前肿大,可大致归纳为甲状腺局部症状、全身症状、消化道症状、情绪症状四个方面;(4)舌象:出现最多者为红舌、薄白苔,其次以淡红舌及白腻苔多见,体现出该病肝气郁滞,多伴痰湿的病机;(5)治法:共6种,频次从高到低归纳为疏肝解郁86次,健脾益肾75次,化痰和胃67次,安神定志15次,益气养阴6次,活血化瘀5次,常以疏肝解郁+健脾益肾作为共同治法;(6)用药:常用183味中药,频次从高到低依次为甘草(112次)、柴胡(86次)、大枣(73次)、黄芩(70次)、黄芪(67次)、半夏(60次)、茯苓(58次)、白术(57次)、绞股蓝(57次)、党参(56次)等;(7)用药性味归经:四气中以温性药物(28%)最多,但整体寒温倾向不明显。五味中甘味药物(47%)最多,其次为苦味(27%)及辛味(24%)。用药归经以走脾经药物(26%)为多。2.数据挖掘:(1)关联规则结果:分析出多个换用药对组合,其中高频两味药药对组合为:柴胡-甘草组合等;三味药药对组合为:柴胡-黄芩-甘草组合等;四味药药对组合为:黄芩-半夏-柴胡-甘草组合等;五味药药对组合为:柴胡-黄芩-甘草-大枣-半夏组合等。以及创新药对组合如黄芪-青风藤-绞股蓝-灵芝-忍冬藤组合等。(2)聚类分析结果:得出药物间内部结构,组合为以下四个基础方:扶正益气方:绞股蓝、灵芝、忍冬藤、青风藤、石楠藤、黄芪;疏肝散结方:黄芩、党参、半夏、大枣、甘草、柴胡、生姜、连翘、夏枯草、浙贝母、五味子;补肾安神方:山药、泽泻、熟地黄、首乌藤、酸枣仁、川芎、法半夏、当归、白芍、合欢花、栀子;化痰行气方:厚朴、紫苏叶、陈皮、茯苓、桔梗、枳实、桂枝、牡蛎、干姜、黄连、白术、人参、升麻、薏苡仁。(3)因子分析结果:得到五个公共因子,公共因子内部的方药功效及性味各异,将其归纳为益气扶正、和解少阳、升阳举陷,与聚类分析结果类似;(4)复杂网络分析结果:得出核心药物为甘草、大枣、柴胡和绞股蓝。3.网络药理学研究:得到154个化合物分子(甘草93个,大枣17个,柴胡17个,绞股蓝24个)。化合物-靶点网络显示:有效化合物度值排名递减依次排列为:MOL000098-quercetin-槲皮素(源自甘草、大枣、柴胡、绞股蓝)、MO L000422-kaempferol-山奈酚(源自甘草、柴胡)、MOL000392-formononetin-芒柄花黄素(源自甘草)、MOL003896-7-Methoxy-2-methyl isoflavone-7-甲氧基-2-甲基-异黄酮(源自甘草)、MOL000417-Calycosin-毛蕊异黄酮(源自甘草),分别能与51、17、13、12、11个靶点蛋白发生相互作用。筛选出靶点基因是P TGS2、AR、NOS2、PPARG、ESR1、ESR2、DPP4,分别能与39、27、16、14、13、13、13个化合物发生相互作用。在以上基因中PTGS2联系,而ESR1-ESR2、ESR1-AR间的联系较为紧密。GO分析:BP中高富集GO术语为:调节DN A结合转录因子的活性,MF中高富集的GO术语为:泛素蛋白连接酶结合的调控及泛素类似蛋白连接酶结合的调控,CC中高富集的GO术语为:核染色质。KEGG分析:存在10条显著富集途径,其中主要富集通路为PI3K-Akt信号通路。由于目前对这些靶标及通路与桥本甲状腺炎关系的文献报道较少,网络药理学结果有待于进一步深入研究。结论1.岳仁宋教授治疗桥本甲状腺炎治疗思路:基于疏肝,更重扶正,关注情志,顾护脾胃。方剂性味配伍通过苦甘化阴气,辛甘通阳气,重视甘味药的使用。2.岳仁宋教授治疗桥本甲状腺炎的核心药物为甘草、大枣、柴胡和绞股蓝,从中提出新方“甘枣柴绞方”3.从核心药物中提出活性成分及靶标基因、通路。炎性反应基因、雌激素受体基因、肿瘤相关靶标基因较为突出。“甘枣柴绞”方以多成分、多靶点、多途径的网络形式作用于桥本甲状腺炎,结果与中医学整体观念相似。并提示研究方向可考虑“垂体-甲状腺-性腺轴”的相互作用及HT与甲状腺肿瘤间的关系。