论文部分内容阅读
本研究通过原生质体单核化技术分别获得赤芝和紫芝的单核菌株,随后进行单单杂交以获取不同于亲本的杂交菌株。随后对获取的杂交菌株进行形态学和分子标记鉴定,并通过生物学特性和药用成分分析筛选出具有杂交优势的灵芝杂交菌株。1.亲本的选择及单核菌株的制备结合实验室已有的灵芝相关实验数据,我们挑选出3株赤芝和4株紫芝菌株作为种间杂交实验的亲本菌株。随后通过原生质体单核化技术分别获取了不同交配型的赤芝单核菌株22株和紫芝单核菌株39株,并进行了相应的交配型测定。2.单单杂交实验将不同交配型的赤芝与紫芝单核菌株进行单单杂交,共计858个配对组合,共获得8株赤芝与紫芝的种间杂交菌株,其配对成功率为0.9324%。3.杂交菌株的鉴定首先,利用锁状联合的观察、核染色以及拮抗反应等方法对获得的杂交菌株进行初步鉴定,随后又通过ITS酶切、SRAP和RAPD等分子标记的方法对杂交菌株进行进一步的验证,实验结果显示杂交菌株明显不同于两株双核亲本菌株,其遗传物质分别源自于两株不同的单核亲本菌株。4.杂交菌株生物学特性的研究通过对所获得的杂交菌株的温度、pH值、生长速度和栽培管性状等四个方面进行分析比较,结果显示：杂交菌株03+1-51×07-5在30℃下菌丝生长速度最快；达到4.68mm/d；杂交菌株03+1-18×07-42在pH7时菌丝生长速度最快,达到4.50mm/d；杂交菌株12-71×05-1是在生长管中最快的,达到10.05mm/d；杂交菌株12-77×05-1在栽培料中的生长速度最快,达到3.36mm/d；显示出杂交菌株与亲本之间的显著差异。5.多糖、三萜含量的测定将所获的杂交菌株通过菌丝和子实体多糖及三萜含量的测定来进行进一步的评价,实验结果显示,杂交菌株12-77×05-1在多糖和三萜类含量等方面都明显优于亲本和其他杂交菌株。