论文部分内容阅读
研究目的:1.获得稳定，准确的含PML/RARa和ABL双基因质粒标准品2.建立检测PML/RARa和ABL基因双重荧光定量PCR方法。3.开发出可应用于临床急性早幼粒白血病病人PML/RARa基因检测试剂盒。方法:1.利用RT-PCR从NB4细胞中扩增出ABL基因克隆至质粒PCMV4-PML/RARa中(该质粒由上海交通大学血液学研究所张小伟博士惠赠)送去测序。测序正确后，将重组质粒命名为PCMV4-PML/RARa-ABL，并对质粒稳定性和反应性能进行评价。2．构建稳定的检测PML/RARa和ABL基因的单重荧光定量PCR反应体系，同时在此基础之上建立稳定双重荧光定量PCR方法，开发出可应用于临床检测白血病病人PML/RARa检测的试剂盒。实验结果:1.成功构建了含PML/RARa和ABL双基因质粒标准品，用于白血病病人PML/RARa基因的定量检测。2.成功开发出用于临床检测白血病病人PML/RARa基因的单重以及双重荧光定量PCR反应试剂盒。结论:1.含PML/RARa和ABL双基因质粒标准品性质稳定，能用于白血病病人PML/RARa基因的准确定量。2.对检测PML/RARa基因的单重以及双重荧光定量PCR反应体系进行性能评价，开发出了稳定的定量检测试剂盒。