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[背景与目的]:动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是动脉壁的慢性疾病,是冠心病、脑梗死、外周血管疾病等心脑血管疾病的共同病理学基础,其主要作用机制是血管壁脂质蓄积和炎症反应增加。巨噬细胞作为AS进程中的关键细胞类型,在炎症和脂质蓄积过程中具有重要作用。研究显示巨噬细胞源性脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)通过增加巨噬细胞对脂质的摄取从而促进泡沫细胞形成,同时巨噬细胞源性LPL还具有促进炎症因子分泌的作用,进而发挥促AS的作用。近年来,研究发现黄酮类化合物在动脉粥样硬化过程中具有重要作用。异黄腐酚(isoxanthohumol,IXN)是从啤酒花中提取的一种异戊二烯基黄酮。研究发现异黄腐酚具有抗炎、抗氧化和调控脂质代谢的作用,但其具体作用机制以及对AS的影响尚不明确。过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)是核激素受体家族中的配体激活受体,在脂质代谢和炎症反应中发挥作用。表明PPARγ能够促进巨噬细胞中LPL表达。同时有研究发现异黄腐酚能够抑制PPARγ。雷帕霉素受体蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)在AS进程中发挥重要作用。mTOR抑制剂雷帕霉素通过抑制PPARγ表达减少脂肪细胞脂质蓄积。Sestrin2是mTOR的负反馈调节因子,Sestrin2表达下调能够增加小鼠动脉粥样硬化斑块面积。本研究的目的是探讨异黄腐酚对巨噬细胞LPL表达及其介导的炎症因子分泌和脂质蓄积的影响及潜在分子机制。我们的研究结果表明异黄腐酚可能通过增加Sestrin2抑制mTOR-PPARγ通路,下调巨噬细胞LPL表达,从而减少巨噬细胞炎症反应和脂质蓄积。这些数据表明异黄腐酚可能为动脉粥样硬化防治提供的新思路。[方法]:使用不同浓度(0、5、10、20、40μM)的异黄腐酚处理THP-1源性泡沫细胞24 h,采用qPCR和Western Blotting方法分别检测巨噬细胞LPL mRNA和蛋白表达情况,然后使用20μM异黄腐酚处理细胞不同时间(0、6、12、24、48 h),qPCR和Western Blotting检测巨噬细胞LPL表达情况;20μM异黄腐酚处理细胞24 h,qPCR和Western Blotting检测mTOR、PPARγmRNA和蛋白表达,然后使用mTOR激动剂亮氨酸和PPARγ激动剂罗格列酮处理细胞,检测细胞PPARγ和LPL表达情况;20μM异黄腐酚处理细胞24 h,qPCR和Western Blotting检测Sestrin2 mRNA和蛋白表达,在此基础上转染Sestrin2 siRNA,检测mTOR、PPARγ和LPL表达情况;异黄腐酚处理细胞后过表达LPL,采用ELISA方法检测促炎因子IL-6、IL-1β、MCP-1、TNF-α和抑炎因子IL-10水平,高效液相色谱法(high phase liquid chromatography,HPLC)检测细胞内总胆固醇(total cholesterol,TC)、游离胆固醇(free cholesterol,FC)和胆固醇酯(cholesterol ester,CE)含量。[结果]:异黄腐酚呈浓度和时间依赖性下调巨噬细胞LPL mRNA和蛋白表达水平。异黄腐酚抑制PPARγ表达,PPARγ激动剂罗格列酮能够逆转异黄腐酚对LPL表达的下调;异黄腐酚抑制mTOR表达,而mTOR激动剂亮氨酸能够缓解异黄腐酚对PPARγ和LPL表达的抑制作用;异黄腐酚能够增加Sestrin2表达水平,在转染Sestrin2 siRNA后,mTOR、PPARγ和LPL表达都得到恢复。异黄腐酚能够显著降低巨噬细胞中促炎因子IL-6,IL-1β、TNF-α和MCP-1水平,增加抑炎因子IL-10水平,减少细胞内TC、FC和CE含量,但在过表达LPL后,促炎因子水平和细胞内脂质含量显著增加,抑炎因子水平则显著降低。[结论]:异黄腐酚通过增加Sestrin2,抑制mTOR-PPARγ通路,下调巨噬细胞源性LPL表达,从而减少巨噬细胞炎症反应和脂质蓄积。