【摘 要】
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蕈菌是指能形成大型子实体的一类丝状真菌,其遗传转化系统的建立对于蕈菌的分子生物学研究及其经济价值的开发利用有重要意义,但目前这方面的研究工作国内外均报道不多,仅限
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蕈菌是指能形成大型子实体的一类丝状真菌,其遗传转化系统的建立对于蕈菌的分子生物学研究及其经济价值的开发利用有重要意义,但目前这方面的研究工作国内外均报道不多,仅限于极少数的几种蕈菌.香菇和金顶侧耳是著名的药、食兼用蕈菌,灵芝在中国传统中药中的应用更有悠久的历史.该实验选用这三种蕈菌作为研究对象,分别建立了原生质体和担孢子的遗传转化系统,并对灵芝的遗传修饰进行了较深入的研究.1)三磷酸甘油醛脱氢酶(GPD)在香菇中呈组成型强表达,我们用PCR扩增法从香菇基因组DNA分离得到GPD基因的启动子,并以此构建了GUS为报告基因、以除草剂抗性为筛选标记的表达载体p301-bG1.2)利用平板出菇,大大缩短了金顶侧耳的出菇时间,收集到大量可用于转化实验的担孢子.3)我们成功地分离了灵芝的原生质体,并提高了原生质体的再生率;在此基础上,以p301-bG1为表达载体成功实现了灵芝原生质体的电击转化,为灵芝的遗传修饰研究奠定了基础.
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