白血病(leukemia)是一种异质性的血液恶性肿瘤,是由于造血组织中血细胞尤其是白细胞发生恶性突变异常增殖产生的。恶性增殖的细胞在骨髓中不断积累,挤压正常造血干细胞生存空间,并影响造血功能的正常发挥。白血病细胞除了在骨髓中影响造血功能外,还会在其他造血器官中诱发癌变,并逐渐浸润人体的其他组织形成肿瘤。在全球所有癌症发病率中,白血病排在前十位,而且死亡率也非常惊人。急性淋巴细胞白血病(Acute lymphoblastic leukemia,ALL)的成人病例中,只有30%～40%的患者能在治疗后获得长期缓解。慢性淋巴细胞白血病(Chronic lymphocytic leukemia,CLL)是西方国家患病率最多的白血病类型,患者多为高龄人群,往往难以承受放射治疗与化学药物治疗带来的副作用,所以治愈率较低。白血病的发生的具体机制尚不明朗,但大多涉及到抑癌基因失活与原癌基因异常表达,探究癌症相关基因在白血病发生发展中的作用,有助于明确白血病发病机制,为临床治疗提供更多可靠的诊断以及治疗信息。Sirt2是酵母沉默信息调节因子Sir2(Silent information regulator 2)在哺乳动物中的同源基因,是一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD~+)依赖性去乙酰化酶,通过与不同底物反应,在许多细胞生理活动中发挥调节功能。有研究指出,Sirt2在急性髓系白血病(AML)以及急性淋巴系白血病(ALL)中Sirt2似乎与预后不良及耐药有关。硫代肉豆蔻酰赖氨酸化合物(Thiomyristoyl,TM)是目前报道的最有效的特异性Sirt2小分子抑制剂,具备广泛的抗癌活性。因此我们希望通过研究TM在人白血病中的作用,为TM在白血病治疗方面提供理论支持。我们选择了实验室现有的9种人类白血病细胞进行TM功能的研究。首先通过MTT法检测了药物处理后细胞活性的变化,再通过体外克隆形成实验明确TM对白血病细胞自我更新和增殖能力的影响。我们发现TM能有效抑制所有实验细胞的活性,这种抑制作用是随浓度增加而增强的。克隆形成实验也表明TM也能够抑制白血病细胞的自我更新和增殖能力。为了探究这一现象,我们进行了细胞周期和细胞凋亡的检测。我们发现,药物处理后白血病细胞只在很小程度上被诱导凋亡增加,而TM在细胞周期方面的影响格外明显。TM能使大部分白血病细胞发生G0/G1期细胞周期阻滞,同时也会使NALM6细胞出现G2/M期细胞周期阻滞。我们通过shRNA及药物处理的方式,利用Western blotting实验对这一现象进行研究,发现TM通过抑制c-Myc蛋白水平上调p21蛋白继而抑制Cyclin D1蛋白的表达水平,这使得细胞无法通过S期检查点,细胞周期被阻滞在G0/G1期。在NALM6细胞中,TM通过激活ATR,引起ATR下游的Checkpoint kinase1(Chk1)增加,从而发挥DNA复制压力检查点功能,使细胞被阻滞在G2/M期。我们还进行了TM与化疗药联合治疗的研究,发现TM与全反式维甲酸(All-trans retinoic acid,ATRA)存在同作用,能有效抑制细胞活力和克隆形成能力。总的来说,我们证明了TM对白血病细胞有增殖抑制作用,这种作用是通过引发细胞周期阻滞来实现的,同时TM还能与化疗药ATRA联合使用抑制白血病细胞的增殖,所以TM具备作为白血病治疗药物的可能,我们的研究为TM在白血病治疗方面提供了理论支持。