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目的:体外实验研究小檗碱对皮肤黑素瘤A375、A875细胞以及人正常表皮黑素细胞HEM-M细胞增殖、周期、凋亡、侵袭的影响,并检测与黑素瘤相关的LncRNA MALAT1、SPRY4-IT1及h-Linc-RP11-875O11.3-001(通过本课题组前期实验基因测序所得)经小檗碱作用后在以上三种细胞中的表达情况,阐明小檗碱抑制黑素瘤的作用及其可能机制,为开发中药抗黑素瘤作用提供新的科学理论依据。方法:体外培养黑素瘤A375、A875细胞以及HEM-M细胞,经不同浓度小檗碱(20,40,60,80,100uM)作用后进行后续实验。倒置显微镜下观察细胞形态改变并通过cck8法检测细胞增殖,计算半抑制浓度(IC50);流式细胞术检测细胞周期及凋亡;Transwell小室实验检测细胞侵袭;采用qRT-PCR法分析经不同浓度小檗碱作用后LncRNA MALAT1、SPRY4-IT1及h-Linc-RP11-875O11.3-001的表达水平;用统计软件SPSS22.0和graphpad prism7软件对数据进行统计分析及计算。结果:1、cck8法结果显示小檗碱可抑制黑素瘤A375、A875细胞增殖,且具有明显时效依赖性和量效依赖性(P<0.05);对HEM-M细胞无明显抑制作用(P>0.05)。由graphpad prism7软件计算得出A375细胞24h、48h、72h的IC50值分别为38.14uM、34.32uM、23.62uM;A875细胞24h、48h、72h的IC50值分别为31.63uM、22.29uM、20.25uM。2、流式细胞术检测细胞周期时结果显示与对照组比较,经低浓度(20、40uM)小檗碱作用后A375、A875细胞周期均呈S期阻滞和G2/M期阻滞(均P<0.05),高浓度(60、80、100uM)小檗碱作用后细胞周期呈G2/M期阻滞(P<0.05);对HEM-M细胞无明显细胞周期阻滞(P>0.05)。3、流式细胞术检测细胞凋亡时结果显示经不同浓度小檗碱作用后,与对照组相比,A375、A875细胞发生早期凋亡及晚期凋亡的细胞数均增加,即总凋亡率升高,并具有统计学意义(P<0.05),对HEM-M细胞凋亡无明显影响(P>0.05)。4、Transwell小室试验结果显示不同浓度实验组穿膜细胞数均低于对照组(P<0.05),并随浓度的升高,穿膜细胞数在逐渐减少,表明小檗碱可抑制黑素瘤细胞的侵袭,并与浓度相关。5、qRT-PCR法检测到与HEM-M细胞相比,LncRNA SPRY4-IT1、MALAT1、h-Linc-RP11-875O11.3-001在A375、A875细胞中均呈现高表达(P<0.05);在A375、A875细胞中与各自对照组(未加小檗碱组)相比,随着小檗碱浓度的增加LncRNA SPRY4-IT1、MALAT1、h-Linc-RP11-875O11.3-001表达水平均逐渐降低(P<0.05),在HEM-M细胞中,随小檗碱浓度的升高,LncRNA SPRY4-IT1、MALAT1、h-Linc-RP11-875O11.3-001表达水平无明显改变(P>0.05)。结论:小檗碱可抑制A375、A875细胞增殖,并具有明显时效依赖性和量效依赖性;可促进黑素瘤A375、A875细胞凋亡,;不同浓度小檗碱可以阻滞A375、A875细胞于S期和G2/M期;小檗碱可以抑制A375、A875细胞侵袭,并与浓度相关;随小檗碱浓度升高,黑素瘤相关LncRNA MALAT1、SPRY4-IT1及h-Linc-RP11-875O11.3-001表达降低;在HEM-M细胞中随小檗碱浓度升高以上三种LncRNAs表达水平无明显改变。综上,小檗碱可能通过抑制黑素瘤A375、A875细胞增殖、促进凋亡、抑制细胞侵袭、调控细胞周期及影响相关LncRNA表达水平等方面对黑素瘤细胞发挥抑制作用。