目的研究基于美白作用机理和透皮吸收的丹参美白凝胶制备工艺。方法采用UV测定490nm处多巴醌的吸光度,考察酪氨酸酶的米氏常数和最大反应速率,绘制Lineweaver-Burk双倒数方程曲线。研究丹参总酚酸和总丹参酮对酪氨酸酶的抑制能力。绘制抑制率-浓度曲线,分析丹参总酚酸对酪氨酸酶的双向调节机理;通过正交实验设计,以丹参素钠、丹酚酸B、丹参总酚酸为指标,优选水提工艺;以丹酚酸B为指标成分,优选大孔树脂型号和纯化工艺;通过正交实验,以丹酚酸B体外透皮吸收率为指标,优选制剂配方;采用薄层鉴别和HPLC测定丹酚酸B含量建立丹参美白凝胶质控标准。结果酪氨酸酶Km=0.2067mg·ml-1,Vm=0.0222·min-1,总丹参酮对酪氨酸酶的抑制率为0,丹参总酚酸对酪氨酸酶的抑制率为28.57%,丹参总酚酸浓度达到10mg·ml-1后Km变大,Vm变小。丹酚酸B能够抑制酪氨酸酶;选择D101大孔吸附树脂分离丹酚酸B,丹酚酸B集中在50%乙醇洗脱液中,纯度67.2%,对酪氨酸酶的抑制率为29.25%;卡波姆0.5g,三乙醇胺0.15mL,甘油5.0g配制成的凝胶得到最高分51。氮酮对丹酚酸B的吸收率有显著性影响(P<0.05);凝胶经过薄层鉴别含有丹酚酸B。HPLC测定丹参美白凝胶中丹酚酸B的含量为1.22mg·g-1。结论总丹参酮不能抑制酪氨酸酶,丹参总酚酸能够可逆的抑制酪氨酸酶,抑制类型为混合I型。丹酚酸B是丹参美白作用的主要成分;D101大孔吸附树脂能够纯化丹酚酸B;最佳制剂配方为:卡波姆1.0g,三乙醇胺0.25mL,甘油5g,氮酮0.5%,挥发油0.1%,载药量为1.8mg·g-1,加超纯水至100g;1g丹参美白凝胶应含有1.2mg丹酚酸B,初步稳定性良好,控制方法简便可行,结果准确可靠,重复性好,可作为本制剂的质控标准。