【摘 要】
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目的通过检测肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis,RIF）大鼠肾脏组织中成纤维细胞激活蛋白（Fibroblast activation protein,FAP）的表达水平,探讨FAP在RIF发生发展中的作用。方法选取40只120-150g SD雄性大鼠随机分成4组:假手术组、模型组、抑制剂组和阴性对照组,每组10只。假手术组大鼠开腹后不结扎输尿管;模型组大鼠开腹后找
【基金项目】
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项目名称:广西医学高层次骨干人才“139”计划,项目合同编号:G201901010,项目来源:广西壮族自治区卫生健康委员会,项目起止时间:2019年1月-2021年12月；
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目的通过检测肾间质纤维化（renal interstitial fibrosis,RIF）大鼠肾脏组织中成纤维细胞激活蛋白（Fibroblast activation protein,FAP）的表达水平,探讨FAP在RIF发生发展中的作用。方法选取40只120-150g SD雄性大鼠随机分成4组:假手术组、模型组、抑制剂组和阴性对照组,每组10只。假手术组大鼠开腹后不结扎输尿管;模型组大鼠开腹后找到左侧输尿管结扎并离断;抑制剂组和阴性对照组大鼠也同样开腹后找到左侧输尿管结扎并离断,并分别在一周后隔天进行尾静脉注射FAP抑制剂（UAMC-1110）和生理盐水,共三次。14天后处死全部大鼠,取大鼠左侧肾脏切片进行HE染色和Masson染色检测肾脏组织的病理变化情况,并计算大鼠肾脏RIF指数。应用免疫组化法检测大鼠肾脏组织FAP、转化生长因子-β1（Transforming growth factor-beta 1,TGF-β1）和α-平滑肌肌动蛋白（α-Smooth muscle actin,α-SMA）的蛋白表达,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-q PCR）检测大鼠肾脏组织FAP、TGF-β1和α-SMA的m RNA的表达,蛋白免疫印迹法（Western blotting,WB）检测大鼠肾脏组织FAP、TGF-β1和α-SMA的蛋白表达。结果1、与假手术组相比,模型组大鼠RIF指数显著升高（P＜0.05）;与模型组相比,阴性对照组大鼠RIF指数无明显差异（P＞0.05）,而抑制剂组大鼠RIF指数显著降低（P＜0.05）。2、与假手术组相比,模型组大鼠肾脏组织FAP、TGF-β1和α-SMA的m RNA表达均显著升高（均P＜0.05）;与模型组相比,阴性对照组大鼠肾脏组织FAP、TGF-β1和α-SMA的m RNA表达均无显著差异（均P＞0.05）;而抑制剂组大鼠肾脏组织FAP、TGF-β1和α-SMA的m RNA表达均显著降低（均P＜0.05）。3、与假手术组相比,模型组大鼠肾脏组织FAP、TGF-β1和α-SMA的蛋白表达均显著升高（均P＜0.05）;与模型组相比,阴性对照组大鼠肾脏组织FAP、TGF-β1和α-SMA的蛋白表达均无显著差异（均P＞0.05）;而抑制剂组大鼠肾脏组织FAP、TGF-β1和α-SMA的蛋白表达均显著降低（均P＜0.05）。4、相关性分析:模型组大鼠肾脏组织FAP的蛋白表达与TGF-β1、α-SMA的蛋白表达以及RIF指数均呈显著正相关（r=0.964,0.956,0.968,均P＜0.05）。结论在UUO所致RIF大鼠中,肾脏组织FAP的高表达可能参与了RIF的发生发展;抑制FAP的表达可减轻大鼠RIF的程度。
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