论文部分内容阅读
目的:探讨雷帕霉素阻断mTOR/p70S6K信号通路对脓毒症大鼠心肌损伤保护作用的机制。研究方法:将90只大鼠随机分为三组:对照组(Sham组)、脓毒症组(Sepsis组)和雷帕霉素治疗组(RPM组),每组30只,采用盲肠结扎穿孔法(CLP)制作大鼠脓毒症模型,Sham组、CLP组每天间隔12小时给予安慰剂2mg/Kg。RPM组在术前半小时予雷帕霉素2mg/Kg,后每天间隔12小时给予雷帕霉素2mg/Kg;造模后6小时、12小时、24小时、72小时、120小时每组分别处死6只大鼠,采集血液,测定血清肌钙蛋白I(cTnI)、CK-MB含量;心室腔插管测定大鼠不同时间心功能及血流动力学;留取心脏组织,酶联吸附法(ELISA)测定心肌TNF-α、IL-6、IL-10浓度;采用酶促反应谷胱甘肽消耗法测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力;硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量。应用免疫印迹检测心肌组织mTOR、核糖体蛋白S6激酶(P70S6K)表达的变化。结果:1、三组大鼠心肌组织损伤病理比较,Sham组心肌结构正常,CLP组出现明显的心肌组织损伤,炎症细胞大量浸润,心肌细胞充血、水肿,甚至出现肌纤维断裂等;而RPM组也存在心肌损伤,但损伤程度较CLP组轻;2、三组大鼠心功能比较:CLP组与Sham组对比,CLP组6～24h心率明显增加(P<0.05),RPM组大鼠与CLP组对比,于6～24h心率明显下降(P<0.05);CLP组与Sham组对比,CLP组6～24h血压明显下降(P<0.05)。RPM组与CLP组对比,于12～24h,血压明显升高(P<0.05);CLP组Sham组对比,CLP组6～24h+dp/dtmax明显下降(P<0.05),RPM组与CLP组对比,于6～12h+dp/dtmax明显升高(P<0.05);CLP组与Sham组对比6～24h-dp/dtmax明显下降(P<0.05),RPM组与CLP组对比,于6～12h-dp/dtmax明显升高(P<0.05);血清cTnI及CK-MB比较,CLP组cTnI、CK-MB的含量明显高于Sham组(P<0.05),而RPM组cTnI、CK-MB含量较CLP组低(P<0.05)3、三组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-10含量比较,CLP组TNF-α、IL-6含量明显高于Sham组(P<0.05),而RPM组TNF-α、IL-6含量较CLP组低(P<0.05);CLP组IL-10含量高于Sham组(P<0.05),RPM组IL-10含量明显高于CLP组(P<0.05)4、三组大鼠血清GSH-Px活力、血清SOD活力、MDA含量比较:CLP组血清GSH-Px、SOD活力明显低于Sham组(P<0.05),而RPM组血清GSH-Px、SOD活力明显高于CLP组。CLP组大鼠血清MDA明显高于sham组,RPM组大鼠血清MDA明显较CLP组低5、心肌组织mTOR及核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)表达的比较,CLP组mTOR及核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)含量明显高于RPM组(P<0.05)。结论:雷帕霉素通过阻断mTOR/p70S6K信号通路进而发挥抗炎症反应、抗氧化应激损伤来减轻脓毒症大鼠心肌损伤。