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利用超积累植物提取土壤中重金属的植物修复技术是极具价值的重金属污染治理技术之一。菌根能够促进植物对氮、磷、以及其它营养物质和水份的吸收,从而增强植物抵抗环境压力的能力。因此,利用植物内生真菌与宿主植物的协同作用提高修复效率是一种极具潜力的修复方案。蒙自桤木(Alnus nepalensis)属于桦木科(Betulaceae)桤木属(Alnus),是一种生长迅速,常生长在被侵蚀的、裸露的土壤和岩石中,在喜马拉雅山脉以东常见的乡土树种。已有研究报道桤木属植物具有一定的重金属积累能力,此外,桤木属植物能够与深色有隔内生真菌(Dark Septate Endophytes, DSE)、丛枝菌根真菌(Arbuscular Mycorrhizal Fungi, AMF)、外生菌根真菌(Ectomycorrhizal Fungi, EMF)联合形成菌根,并能与弗兰克氏菌(Frankia)形成根瘤固氮。深色有隔内生真菌(DSE)是一类定殖于植物根部的小型真菌,它们广泛分布于各种生态系统中,特别是在受胁迫的环境中,是一类生态学功能尚不清楚的内生真菌。本论文以云南募乃铅锌矿区为研究对象,对矿区内自然生长的蒙自桤木地上部分、地下部分对锌、铅、镉的吸收积累情况,及其根内DSE定殖情况进行了调查;从植物根部分离得到了一批DSE菌株,并对这些菌株进行了分子生物学的初步鉴定。探讨了纯培养条件下,这些菌株对重金属Cd2+的抗(耐)性,并对抗性菌株进行了EC5o(半效应浓度)值的测定,得到了以下的主要结果和结论:1.用碱解离-酸性品红染色法对云南普洱市,澜沧县募乃铅锌矿区的五个样地48株蒙自桤木根内DSE和AMF定殖情况进行了调查,并对五个样地土壤中的锌、铅、镉含量进行了测定。结果发现,样地P1、P2、P3锌、铅、镉含量严重超出国家三级标准,属于重度污染区域;样地P4和P5锌、铅未超标,而镉超出国家标准,属于轻度污染区域。在所调查的蒙自桤木根内均发现DSE和AMF定殖,并形成典型的微菌核和AM结构。五个样地DSE定殖率从26.11%到35.51%,属于中度定殖,并且DSE定殖率随着土壤重金属浓度的增加而呈现出先增加后降低的趋势;AMF定殖率从20.22%到29.20%,也属于中度定殖,但是随着土壤重金属浓度的增加AMF定殖率没有明显趋势。2.从募乃铅锌矿区五个样地的蒙自桤木根内分离得到153株深色真菌,样地P1P2、P3、P4、P5的分离比率分别为3.5:1、4.4:1、3:1、2.5:1和2.75:1,并进一步对这些真菌进行了分子鉴定,其中大部分菌株属于子囊菌(包括Cladosporium、 Exophiala、Cladophialophora、Phialophora、Leptodontidium、Paraphoma)还有一些分类地位尚不明确,在己鉴定到属的菌株中,优势属为Phialophora,共有31株。3.对153株DSE真菌进行Cd2+的抗(耐)性的初步筛选,发现分离自重金属污染较严重的样地P1、P2和P3的100株真菌普遍对Cd2+抗性较强,甚至有19株菌在Cd2+浓度为600mg/L时,仍能生长,也有2株对Cd2+较为敏感;然而来源自样地P4、P5的53株菌对Cd2+抗性较弱,其中有23株在较低Cd2+浓度下不能生长,同时也有5株在Cd2+浓度为600mg/L时仍能正常生长。进一步对镉高抗性菌株中的11株菌进行了ECso值的测定,发现这些菌株EC50值普遍在150mg/L左右,其中分离自样地P1的菌株PB43镉抗性最强,EC50值达到了234.42mg/L。4.对自然生长于五个样地的蒙自桤木锌、铅、镉的吸收和积累特征进行了初步研究,并对其应用于植物修复重金属污染土壤进行了评估。蒙自桤木地下部分锌、铅、镉含量的范围分别是212~6285mg kg-1,41~36846mg kg-1和6-82mg kg-1,地上部分含量分别是92-263mg kg-1,24-219mg kg-1和10~59mg kg-1.蒙自桤木对Zn的生物积累因子和生物转移因子分别是从0.19到21.92和从0.34到0.79;Pb是从0.01到7.02和从0.04到1.44;Cd是从0.12到34.36和从0.04到2.06。并通过相关性分析发现蒙自桤木地下部分重金属含量与土壤重金属含量之间存在着显著的正相关(Zn R=0.94, Pb R=0.99, Cd R=0.98; P<.01).上述研究结果表明,DSE和AMF普遍定殖于募乃铅锌矿区自然生长的蒙自桤木根系上,是蒙自桤木根系上的一个正常组分,其生物学和生态学功能值得进一步研究;从蒙自桤木根系上分离得到了153株根内生真菌,其中Phialophora属为优势属;分离自重金属严重污染区域和轻度污染区域的DSE菌株中都存在镉高抗和敏感菌株,但来自重度污染区的DSE菌株Cd2+抗性普遍高于轻度污染区的菌株;蒙自桤木有相对较高的锌、铅、镉耐受能力,并在地下部分可以积累大量的重金属,在云南省锌铅矿区土壤重金属的植物固定、植被恢复中具有较好的应用前景。