目的：通过培养原代人膝骨关节炎滑膜细胞,观察独活寄生汤加黄芪含药血清对P2代人膝骨关节炎滑膜细胞中肿瘤细胞坏死因子(TNF-α)与白介素(IL-6)的影响,探讨膝骨关节炎的炎症反应机制,以及独活寄生汤加黄芪治疗膝骨关节炎的疗效机理,为独活寄生汤加黄芪治疗膝骨关节炎提供科学依据。方法：将SPF级雄性SD大鼠分为三组,通过灌胃给予独活寄生汤加黄芪、美洛昔康(莫比可)及生理盐水,连续3天后腹主动脉采血制备药物血清。将通过培养的P2代人膝骨关节炎滑膜细胞分别给予独活寄生汤加黄芪血清(中药组)、美洛昔康(莫比可)血清(西药组)及生理盐水血清(空白组)干预24h,分别运用qRT-PCR及ELISA检测其对人膝骨关节炎滑膜细胞中TNF-α、IL-6的影响。结果：通过qRT-PCR检测发现,中药组IL-6及TNF-α mRNA的表达量为0.53±0.082、0.68±0.054,接近空白组的50%,西药组分别为0.27±0.117、0.37±0.093,相当于空白组的35%(P<0.05)。通过ELISA检测,中药组IL-6及TNF-α蛋白的表达量分别为21.06±1.427ng/ml、37.62±1.970ng/ml,为较空白组减少约30%,西药组分别为12.86±3.619ng/ml、24.77±3.024ng/ml,减少了50%(P<0.05),西药组下降明显但和中药组相比,两者无统计学差异(P>0.05)。结论：独活寄生汤加黄芪对P2代人膝骨关节炎滑膜细胞TNF-α、IL-6的表达有明显抑制作用,表明该方可通过控制炎症反应的发生,改善膝关节疼痛及功能活动,发挥治疗膝骨关节炎的作用。