神经调节素1β对大鼠脑缺血再灌注损伤后HPK1的影响

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目的:缺血性脑卒中是一种复杂的神经系统疾病,可导致脑组织的不可逆性坏死。本研究旨在探讨神经调节素1β(neuregulin1β,NRG1β)对大鼠脑缺血再灌注(middle cerebral artery occlusion/reperfusion,MCAO)损伤后造血祖细胞激酶1(hematopoietic progenitor kinase 1,HPK1)表达的影响和意义。方法:成年健康雄性Wistar大鼠70只,体质量240~270 g,随机分为3组,假手术组、模型组、NRG1β治疗组。采用改良Longa法制备大鼠脑缺血2h再灌注24h模型,用激光多普勒血流仪监测实验动物大脑中动脉供血区的血流变化,当插入线栓后局部脑血流量平稳降到插线前的30%及以下,拔出线栓后脑血流量恢复至插线前的80%及以上作为动物纳入标准。改良神经功能缺损评分(modified neurological severity score,mNSS)评价神经行为功能,干湿称重法测定脑含水量,苏木精伊红(hematoxylin-eosin,H&E)染色检测神经细胞病理形态,尼氏(Nissl)染色检测神经元的形态变化,原位末端标记法(in situ cell death,TUNEL)染色检测神经细胞凋亡,荧光法测定血脑屏障(blood brain barrier,BBB)伊文斯兰(Evans Blue,EB)的渗漏率,免疫组化染色和免疫印迹检测HPK1表达水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠mNSS评分升高,脑含水量升高,神经细胞排列异常,神经元形态结构改变,凋亡细胞数增多,伊文斯兰的渗漏率增多,p-HPK1蛋白表达增强(P<0.05)。与模型组相比,NRG1β治疗后大鼠神经行为功能改善,脑含水量明显下降,神经细胞的变性细胞数减少,神经元的异常形态结构改善,凋亡细胞数减少,血脑屏障得到改善,同时大鼠脑缺血再灌注损伤后HPK1的表达受到抑制(P<0.05)。结论:NRG1β对大鼠脑缺血再灌注后损伤有神经保护作用,可能与其抑制HPK1表达有关。
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