论文部分内容阅读
该研究应用人脐静脉内皮细胞ECV304细胞模型,采用FC,ELISA,RT-PCR,免疫组化,原位杂交,Western Blot印迹,Realtime RT-PCR等技术和方法,从细胞和分子水平研究Ox-LDL、LPC对内皮细胞(EC)VEGF蛋白和VEGF mRNA表达的影响及可能的信号转导途径,进一步了解VEGF和Ox-LDL在内皮细胞损伤中相互作用关系,从而深入了解它们在SA发生发展中的作用机制.同时发现一些抑制VEGF表达的中药有效成分,为它在防治AS方面的应用提供理论依据.结果发现,Ox-LDL、LPC可以显著增加内皮细胞VEGF蛋白和VEGF mRNA的表达;药物普罗布考(Pro)和中药有效成分欧芹素乙(IMP)、银杏叶提取物(GbE)、丹酚酸B(Lsab)和何首乌提取物二苯乙烯苷(ST I)可以抑制Ox-LDL、LPC的作用.提示在AS发展过程中Ox-LDL与VEGF可能共同发挥作用,尤其是在AS发展过程中Ox-LDL与VEGF可能共同发挥作用,尤其是在AS发生的早期;药物普罗布考和中药有效成分IMP、GbE、Lsab和ST I对ECV304中VEGF mRNA表达具有抑制作用,从另一侧了解普罗布考、丹参和银杏提取物对AS的作用机制,同时提示中药有效成分IMP和ST I在AS预防和治疗中的潜在价值.Ox-LDL、LPC可以增加内皮细胞VEGF受体KDR的高表达,同时可激活ERK1/2和p38 MAPK信号转导途径;加入VEGF受体抑制剂、ERK1/2特异性抑制剂PD98059、U0126和p38 MAPK特异性抑制剂SB202190、SB203580后,可以抑制Ox-LDL、LPC对内皮细胞VEGF的高表达,同时可以降低细胞Raf、MEK1/2、p44/p42 MAPK、Elk-1、p38 MAPK和MAPKAPK-2蛋白的磷酸化程度,提示Ox-LDL、LPC对内皮细胞VEGF的表达主要是通过受体KDR和ERK1/2途径介导的,部分是通过p38 MAPK信号转导途径介导的.