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自20世纪60年代末,在免疫学、生物化学、内分泌学等学科的基础上,逐渐兴起了一门边缘学科——激素免疫学,为探讨取代动物传统外科阉割的新方法提供了新的思路。用外源性GnRH主动免疫动物,刺激动物机体产生大量抗GnRH特异性抗体,引起生殖内分泌系统平衡的失调,改变下丘脑-垂体-性腺轴间的正常反馈调节关系,以减少生殖激素的合成和分泌及终止配子的发生,从而达到免疫去势的目的。GnRH主动免疫可避免外科阉割引起的动物高度应激、外科伤口容易感染,增加动物发病率甚至导致动物死亡等诸多不足,已成为最有望替代外科阉割的安全友好方法。目前,国内外一些学者已在该领域开展了相关研究,但大多采用GnRH单体或并列体作为免疫原,效果不甚理想。本试验用蛋白结构修饰后的GnRH并列体二聚物(G6k-GnRH-Tandem-Dimer)与卵清蛋白偶联,以Specol为佐剂,主动免疫雄性藏绵羊,以研究其对雄性藏绵羊繁殖性能的影响。试验选取24周龄、体重17-19Kg的雄性藏绵羊35只,随机分为免疫去势组、完整对照组和手术去势组,其中免疫去势组和完整对照组均为12只,手术去势组11只。25周龄时免疫去势组各只绵羊于颈部皮下注射2 mL GnRH并列体二聚物卵清蛋白复合物(TDK-OVA)的Specol乳化剂(含TDK 100μg),8周后加强免疫一次,注射剂量及方法同初次免疫。完整对照组不做任何处理,手术去势组则在试验开始前一周(24周龄)进行外科手术去势。初次免疫当天记为0 wpv。初免当天及初免后第4、8、12、16wpv(即每4周1次,直至屠宰)颈静脉采集血样,酶联免疫法(ELISA)测定血清抗体滴度及激素含量变化。加强免疫后8周(即16 wpv),屠宰所有试验绵羊,分离垂体及两侧睾丸,记录睾丸重量及睾丸体积。一侧睾丸用于组织学分析,Real-Time quantitative PCR分析垂体及另一侧睾丸生殖相关基因mRNA表达变化。结果显示,免疫去势组产生了良好的抗体反应,初免后机体产生抗体,加免后血清抗GnRH抗体滴度快速升高,由加免当天的30.25ng/mL升高到12周(12wpv)的最高峰(91.72ng/mL),后保持在较高水平,直至屠宰(80.59ng/mL)。与完整对照组相比,免疫去势组血清T含量显著下降(P<05),屠宰时仍维持在较低水平(4.27ng/mL)。与完整对照组和手术去势组相比,免疫去势组血清LH和FSH显著下降(P<0.05),屠宰时仍维持在较低水平,分别为0.28ng/mL、0.32ng/mL。手术去势组血清LH和FSH均显著高于完整对照组(P<0.05)。与完整对照组相比,GnRH主动免疫显著下调绵羊垂体GnRH-R、LH-β、FSH-β及睾丸LH-R、FSH-R mRNA表达水平(P<0.05),而手术去势组绵羊垂体GnRH-R、LH-β、FSH-β表达水平显著高于免疫去势组和完整对照组(P<0.05)。屠宰时,完整对照组睾丸平均重量为51.71±7.58g,平均体积为49.04±6.66cm3；免疫去势组睾丸平均重量为41.58±5.77g,平均体积为39.91±6.02cm3。与完整对照组相比,免疫去势组睾丸发生萎缩,其重量及体积均下降到对照组睾丸的80%(P<0.05)。组织学分析发现,免疫去势组绵羊睾丸曲细精管上皮组织严重受损,间质细胞萎缩且数量明显减少,精子发生停止,管内仅有少数退化的精原细胞。上述研究结果表明,GnRH主动免疫能够：(1)显著降低血清T、LH和FSH浓度；(2)显著下调垂体GnRH-R、LH-β、FSH-β及睾丸LH-R、FSH-R mRNA表达水平；(3)有效抑制雄性藏绵羊睾丸的发育和精子的发生。综上所述,GnRH主动免疫能够有效地抑制雄性藏绵羊的繁殖性能。