葡萄糖甘油二脂促进实验大鼠肺栓塞溶解作用研究

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目的:采用的是异硫氰酸荧光素(FITC)标记纤维蛋白(原),注入实验大鼠体内造模。较真实地模拟肺血栓栓塞症(PTE)过程。观察大鼠肺(PTE)后不同时间血浆溶栓变化及葡萄糖甘油二脂(GDG)治疗对其影响,探讨GDG可能的溶栓机制,为临床选择GDG治疗PTE提供理论依据。 方法:雄性SD大鼠70只,尾静脉注入FITC标记血栓,复制大鼠PTE模型,随机分组如下,每组7只: 1)正常对照组; 2)PTE组:又分PTE组(造模成功后未加任何处理组);PTE阴性对照组4小时注射生理盐水组; 3)GDG溶栓治疗组: 分为单次给药组(造膜成功后4小时后)分别给予单链尿激酶型纤溶酶原激活剂(1000U/kg)、GDG溶栓高剂量组(10mg/kg)、GDG溶栓中剂量组(5mg/kg)、GDG溶栓低剂量组(2.5mg/kg); 多次给药组(造膜成功后4小时后,连续4天给药)给予单链尿激酶型纤溶酶原激活剂(1000U/kg)、GDG溶栓组(5mg/kg)。在实验结束时处死动物,留取肺脏观察组织病理改变、血浆标本测定单链尿激酶型纤溶酶原激活剂、GDG各个溶栓溶栓效果、纤溶活性。 结果:(1)栓子自溶率低,为较持久、稳定的实验模型,适于PTE的溶栓研究。肺组织病理改变:PTE后4h见有少量继发血栓形成,血栓及血管壁内可见白细胞浸润;PTE后5d见注入的血凝块明显溶解,代之以新形成的血栓。栓塞后2h,1d,5d的栓子自溶率低,为较持久、稳定的实验模型,适于PTE的溶栓研究。能较好的满足5d溶栓试验的需要。 (2)单次给药组在探讨褐藻中活性成分的基础上,进一步研究其有效成份GDG的溶栓作用。GDG中、高剂量组静脉注射对大鼠肺血栓具有明显的纤溶促进作用,并呈现较好的量效关系。5 mg/kg及10 mg/kg GDG的纤溶促进能力略高于单链尿激酶型纤溶酶原激活剂组,显示GDG中、高剂量组有较好纤溶促进作用。 (3)连续给药研究,利用尾静脉注入FITC标记纤维蛋白原成栓的方法成功的复制了大鼠PTE模型,揭示了血浆纤溶活性在大鼠PTE后不同时间的动态变化。本研究发现大鼠PTE后机体纤溶活性增加,溶栓治疗可以有效改善血浆纤溶活性。本研究还发现GDG 5mg/kg加连续4天方案治疗大鼠PTE没有引起全身继发纤溶激活。 结论:我们对此模型及采用的方法学总体评价较好。此模型制备较简单,成功率高,自发溶栓作用很低,栓子在长时间内非常稳定,结果可信度高;而且可动态、形象生动的观察溶栓,是一种较好的研究方法。应用设备简单,用小动物可进行较大样本和较多分组的研究。GDG进入体内可进一步促进内皮细胞合成和分泌u-PA,增加,使血浆荧光值、纤溶酶原活性升高,这可能是GDG的一个重要的溶栓机制;推测血浆荧光水平增高的意义是促进内源性纤溶和血栓溶解。单次给药实验,GDG中、高剂量组(5 mg/kg,10 mg/kg)有较好纤溶促进作用。连续给药实验。推测GDG具有一定的纤维蛋白特异性,提示GDG多次给药方案治疗大鼠PTE是可行的。 总之,GDG的溶栓作用及其对u-PA的影响,为褐藻活性物质(GDG)具有较好的溶栓作用、抑制PAT-1活性同时升高u-PA等生物效应提供了有力的依据。为GDG用于临床实验、药物、保健品开发提供理论基础。
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