超顺磁性紫杉醇脂质体靶向通透血脑屏障的实验研究

来源 :中国人民解放军军医进修学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chenwu2005
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背景:恶性星形细胞瘤是最常见的成人颅内原发肿瘤,危害巨大。恶性星形细胞瘤的浸润性生长特性、人脑组织的精细结构和脑组织在人体中极为重要的地位决定了无法行手术将此肿瘤完全切除。化学药物治疗则可避开这个局限。但血脑屏障的存在、P-gp的“泵出”机制等导致很多在体外疗效显著的化学药物无法在脑组织中达到有效治疗浓度。目的:制备超顺磁性紫杉醇脂质体(SMPL),观察其在外磁场作用下脑组织中的浓聚效应,并初步探讨经颈动脉注射对药物靶向脑内浓聚的意义。方法:1.SMPL制备及表征:以紫杉醇(PTX)、Fe3O4为化学治疗药物,通过反相蒸发法制备SMPL,并以透射电子显微镜(TEM)、磁性能测试仪、高效液相色谱分析(HPLC)等对SMPL的理化特性进行研究。2.动物实验:(1).Wistar大鼠分为A、B、C三组,按2.5ml/kg经颈动脉注射含PTX浓度均为1.0mg/ml的药液,其中A组予SMPL悬液,注射药物后将动物头部置于0.5T磁场中1h,B组仅予SMPL悬液,C组予PTX-无水乙醇-聚氧乙基代蓖麻油溶液(成份同市售PTX注射液)。3组动物均于注射药物后1h处死取脑,行普鲁士蓝染色观察大鼠脑组织中的铁粒子蓝染颗粒。(2).Wistar大鼠仍分为A、B、C三组,按5ml/kg经阴茎背侧静脉注射药物,药物种类同(1)。3组动物各自分别于注射药物后1h、4h、8h、16h处死取脑,以HPLC检测脑组织中PTX浓度。(3).Wistar大鼠分两组,一组经颈动脉注射SMPL(1ml/kg)后头部加磁场1h,另一组经阴茎背静脉注射SMPL(5ml/kg)后头部加磁场1h,之后处死取脑以HPLC检测脑组织内PTX浓度。结果:1.SMPL表征:TEM显示SMPL呈球形,粒径多在15 nm左右。磁滞回线显示sMPL有较好的超顺磁特性。包封率(%)为99.76%。2.动物实验:(1).脑组织普鲁士蓝染色显示Fe3O4的蓝染颗粒出现于血管外的脑组织中、神经细胞的胞核位置,且A组脑组织切片中的蓝染颗粒密度明显大于B组,而C组中则未见蓝染颗粒。(2).HPLC检测显示A、B、C组间两两比较,大鼠脑内PTX浓度均存在显著统计学差异,A组最高,B组次之,C组最低。(3).经颈动脉注射SMPL(1ml/kg)加磁场1h组的大鼠脑组织内PTX浓度仍显著高于经阴茎背静脉注射SMPL(5ml/kg)加磁场1h组。结论:1.SMPL为较理想的超顺磁性纳米级药物载体。2.SMPL可以载Fe3O4进入脑组织中甚至神经细胞内,外加磁场可促进Fe3O4跨BBB的运动。3.SMPL可以载PTX跨BBB而进入大鼠脑组织中,外磁场可显著提高PTX在脑组织中的浓度。4.经颈动脉注射可使药物直接进入大鼠脑内血管中,较之经静脉注射,前者可大大提高脑组织内的药物浓度。
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