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[目的]1.建立高效液相法同时测定大鼠血液和大脑、肝脏、肾脏、胃壁组织检材中文拉法辛及其主要代谢产物O-去甲文拉法辛含量的方法。2.用所建立的方法,测定以盐酸文拉法辛灌胃给药后不同时间点文拉法辛、O-去甲文拉法辛在大鼠血液和大脑、肝脏、肾脏、胃壁组织检材中的含量,探索文拉法辛、O-去甲文拉法辛和总活性成分(文拉法辛与O-去甲文拉法辛总和)在这些检材中的分布变化规律。[方法]建立盐酸文拉法辛灌胃给药大鼠模型。分别于灌胃后1h、2h、4h、6h、8h麻醉采血,取大脑、肝脏、肾脏、胃壁组织器官。采用高效液相色谱法,利用外标校正曲线法同时测定灌胃给药后大鼠血液及各组织中文拉法辛及其活性代谢产物O-去甲文拉法辛的含量。对比分析灌胃给药盐酸文拉法辛大鼠体内文拉法辛、O-去甲文拉法辛及总活性成分在血液及各组织中的分布情况及随时间的变化规律。[结果]文拉法辛与O-去甲文拉法辛在高效液相色谱条件下的出峰时间分别为7.1min、5.1min。检测时杂质对目标物干扰小。血液和大脑、肝脏、肾脏、胃壁组织中检测文拉法辛的线性范围分别为0.8～10.0μg/mL、0.8～20.0μg/g、0.8～40.0μg/g、1.0～40.0μg/g、1.0～200.Oμg/g,定量限为线性范围最小值。O-去甲文拉法辛在血液和大脑、肝脏、肾脏、胃壁组织中的线性范围分别为 0.8～10.0μg/mL、0.8～20.0μg/g、0.8～40.0μg/g、1.0～40.0μg/g、1.0～40.0μg/g,定量限为线性范围最小值。血液中文拉法辛在1.0μg/mL、2.0μg/mL、4.0μg/mL、6.0μg/mL四个实际添加含量下的平均萃取回收率在83.73%～91.53%之间,平均准确度在95.00%～103.22%之间;血液中O-去甲文拉法辛在这四个实际添加含量下的平均萃取回收率在65.88%～71.66%之间,平均准确度在93.68%～102.89%之间。大脑组织中文拉法辛在2.0μg/g、4.0μg/g、6.0μg/g、20.0μg/g四个实际添加含量下的平均萃取回收率在78.74%～82.38%之间,平均准确度在93.95%～100.02%之间;大脑组织中O-去甲文拉法辛在这四个实际添加含量下的平均萃取回收率在66.70%～71.88%之间,平均准确度在93.97%～102.93%之间。肝脏组织中文拉法辛在2.0μg/g、4.0μg/g、6.0μg/g、20.Oμg/g四个实际添加含量下的平均萃取回收率在76.34%～81.85%之间,平均准确度在96.86%～106.02%之间;肝脏组织中O-去甲文拉法辛在这实际添加含量下的平均萃取回收率在60.99%～65.42%之间,平均准确度在94.86%～103.22%之间。肾脏组织中文拉法辛在2.0μg/g、4.Oμg/g、6.Oμg/g、20.0μg/g四个实际添加含量下的平均萃取回收率在70.19%～77.43%之间,平均准确度在104.93%～124.21%之间;肾脏组织中O-去甲文拉法辛在这四个实际添加含量下的平均萃取回收率在62.92%～68.03%之间,平均准确度在99.37%～123.20%之间。胃壁组织中文拉法辛在2.0μg/g、6.0μg/g、20.0μg/g、100.0μg/g四个实际添加含量下的平均萃取回收率在76.70%～92.23%之间,平均准确度在83.48%～105.42%之间;胃壁组织中O-去甲文拉法辛在2.0μg/g、6.0μg/g、20.Oμg/g三个实际添加含量下的平均萃取回收率在62.84%～70.20%之间,平均准确度在92.36%～104.17%之间。灌胃后4h内文拉法辛、O-去甲文拉法辛在大鼠胃壁、肝脏、肾脏组织中含量较高,血液与大脑组织中含量相对较低。4h内大鼠血液及各组织中以文拉法辛为主,4h后各组织中文拉法辛、O-去甲文拉法辛含量差异较小。大鼠肾脏中文拉法辛及O-去甲文拉法辛浓度长时间维持在较高水平。灌胃后文拉法辛在大鼠血液与胃壁组织中整体呈下降趋势,其余各组织中呈先升后降趋势。大鼠血液中文拉法辛代谢较快。大鼠各组织中文拉法辛含量在1h至2h内变化不明显,2h至4h内排除较快,4小时后趋于平稳。O-去甲文拉法辛在血液及各组织内含量变化相对较小,整体呈先升后降趋势,达峰时间与文拉法辛在各组织中达峰时间基本一致。各组织中总活性成分在1h至4h内以文拉法辛为主,4h后文拉法辛与O-去甲文拉法辛在各组织中含量差异较小,各组织中总活性成分含量随时间的变化趋势与文拉法辛含量的变化趋势基本一致。[结论]本课题建立了大鼠血液和大脑、肝脏、肾脏、胃壁几种组织检材中文拉法辛及其活性代谢产物O-去甲文拉法辛进行同时含量测定的高效液相色谱法,用以探索灌胃给药盐酸文拉法辛大鼠血液及各组织中文拉法辛的分布及代谢规律,方法学验证显示:该方法杂质干扰小,定量测定稳定准确,无残留影响。通过本研究表明:肾脏组织可作为涉及文拉法辛中毒死亡案件检测的首选检材。灌胃后文拉法辛在大鼠血液中代谢较快。灌胃给药4h内文拉法辛在大鼠各组织中的含量较高,4h后文拉法辛与O-去甲文拉法辛含量差别较小。