多壁碳纳米管/量子点复合物的制备、表征及其与HeLa细胞相互作用研究

来源 :湖南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xueyingnn
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本论文将碳纳米管(CNTs)和量子点(QDs)的优点相结合,采用共价交联、自组装等方法制备了多壁碳纳米管-CdSe/ZnS核-壳型量子点(MWCNT-QD)复合物。采用高分辨透射电子显微镜(HRTEM)、红外光谱(FTIR)、紫外-可见(UV-vis)光谱、荧光光谱及荧光显微镜等分析测试技术,详细研究了不同制备条件下MWCNT-QD复合物的微观形貌、表面功能基团、紫外-可见/光光谱性能;在优化条件下制备了MWCNT-QD复合物,并对其HeLa细胞毒性、与HeLa细胞作用不同时间后的荧光稳定性进行了详细研究;此外,初步探讨了MWCNT-QD对绿色荧光蛋白质粒(pEGFP)的转染性能。本论文具体研究工作如下:1.采用共价交联-巯基组装方法,设计了不同的制备方案,分别将CdSe/ZnS核-壳型QDs修饰至聚酰胺-胺(PAMAM)树状分子修饰的MWCNTs表面,制备了MWCNT-QD复合物;利用红外光谱、荧光光谱、紫外-可见光谱及高分辨透射电子显微镜对MWCNT-QD复合物的表面功能团、紫外-可见/荧光光谱性能和微观形貌进行了详细研究。结果表明:在优化的实验条件下,QDs可较密集、均匀地修饰至MWCNTs表面,利用巯基乙酸修饰QDs对于制备MWCNT-QD复合物具有重要作用;修饰过程没有改变QDs的荧光发射波长。2.采用荧光显微镜、MTT检测等多种分析测试方法研究了MWCNT-QD复合物对HeLa细胞的毒性、与HeLa细胞作用不同时间后MWCNT-QDs复合物的荧光稳定性;并对PAMAM修饰的MWCNT-QD复合物的pEGFP转染性能进行了初步研究。结果表明:在小于100μg mL-1的浓度范围,MWCNT-QD复合物对HeLa细胞无明显细胞毒性;MWCNT-QD复合物暴露在活细胞体系72小时后也能保持较好的荧光稳定性。MWCNT-QD复合物可将pEGFP基因传输至HeLa细胞内部,且pEGFP可在细胞内表达发出绿色荧光,但转染效率较低(1.74%)。3.采用非共价方法将CdSe/ZnS核-壳型QDs组装到油胺(Oleylamine)修饰的盐酸纯化MWCNTs表面。采用TEM详细研究了不同溶剂对所制备MWCNT-Oleylamine-QD复合物微观形貌的影响;并利用荧光光谱、荧光显微镜、MTT检测等分析测试技术研究了MWCNT-Oleylamine-QD复合物荧光特性、对HeLa细胞的毒性及与HeLa细胞作用不同时间后的荧光稳定性。结果表明:在乙醇溶剂中,油胺可以将MWCNTs与QDs联接,并实现QDs在MWCNTs表面的均匀修饰。在小于100μg mL-1的浓度范围,MWCNT-Oleylamine-QD复合物对HeLa细胞毒性较小。MWCNT-Oleylamine-QD复合物在活细胞体系中具有较高的荧光量子产额,其荧光稳定性在24 h内能得到较好的维持。
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