【摘 要】
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以公鸡肠道、西红柿和乳制品为研究对象,经乳酸菌分离鉴定的BCP平板反复划线分离和筛选,最后经革兰氏染色,得到七十二株革兰氏阳性产酸菌株的纯培养。用苯酚一硫酸法和乙醇沉
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以公鸡肠道、西红柿和乳制品为研究对象,经乳酸菌分离鉴定的BCP平板反复划线分离和筛选,最后经革兰氏染色,得到七十二株革兰氏阳性产酸菌株的纯培养。用苯酚一硫酸法和乙醇沉淀法检测这些菌株的透析后发酵液中是否有多糖,进一步筛选出产胞外多糖的五株菌株Z222,Z581,X1121,H6和D121。分别对它们进行纯度检查,菌落和个体形态观察:产乳酸测定、过氧化氢酶和水解淀粉试验、运动检查、菌种的培养特性和常规的生理生化试验鉴定,综合上述数据并结合《伯杰氏细菌鉴定手册》(第八版)和《乳酸菌分类鉴定》,鉴定Z222、X1121、D121菌株属于肠球菌属,Z581属于片球菌属,H6菌株属于明串珠菌属。对五株菌株中产EPS较好的Z222菌株进行了16Sr DNA序列分析,所得序列在GenBank中用Blast进行基因同源性查询的结果是该菌株与肠球菌属的坚强肠球菌(Enterococcus durans)的同源性为99%,故该菌株与坚强肠球菌的亲缘关系最近,可以认为Z222是一株坚强肠球菌,命名为Enterococcus durans Z222。薄层层析(TLC)分析表明该菌株确实具有产EPS的特性,急性毒性试验结果证明该菌不是致病菌株,因此,作为发酵产胞外多糖研究的出发菌株是安全的。 为了提高EPS产量,本论文研究了培养基中碳源和培养条件对Enterococcus durans Z222菌株的生长和EPS产量的影响。产多糖对照试验表明Enterococcus duransZ222菌株在合成培养基GA和MRS培养基中的生长情况和EPS的产量不同,在MRS培养基中所获得的生物量和EPS产量均高于在合成培养基GA中发酵所得相应值,说明MRS培养基组成更适于该菌种的生长。同时为了利于下一步分离提取EPS,将
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