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脑血管疾病中缺血性的脑血管病对人体健康伤害较为严重,脑缺血一定时间恢复血液供应后,其功能不仅不能恢复,却出现更加严重的脑机能障碍,造成脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)。随着生活水平的提高,脑缺血疾病发病率、死亡率日益提高,对人们的正常生活造成了严重影响。中药素有“多靶点、多效应”的特点,传统中医药将CIRI归于“中风”的范畴,一直以来探讨中医药宝库,创新中医药在缺血性脑血管病的治疗理论,寻找促进有效治疗缺血性脑血管病的中药制剂。珍龙醒脑是治疗脑血管疾病的经典藏药验方。主要由珍珠、天竺黄、西红花、丁香、肉豆蔻、豆蔻、草果、檀香、紫檀香、沉香、诃子、毛诃子、余甘子、木香、肉桂、荜茇、螃蟹、金礞石、香旱芹、人工牛黄、人工麝香、广枣、烈香杜鹃、塞北紫堇、短穗兔耳草、铁粉(炙)、冬葵果、甘草、黑种草子组成。具有开窍醒神,清热通络的功能。用于痰瘀阻络所致的中风,语言蹇涩,半身不遂,口眼歪斜。其临床效果确切,但其机制研究尚未有报道。本研究通过缺氧、结扎颈总动脉、大脑中动脉阻断等动物模型,观察珍龙醒脑在抗脑缺氧、脑缺血再灌注后MDA、SOD、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶的活力,以及脑缺血再灌注后神经学评分表现及对脑梗死体积的影响,探讨该药抗CIRI的机制和保护作用。一珍龙醒脑对小鼠抗缺氧的影响1珍龙醒脑对小鼠常压缺氧的影响将小鼠随机分为空白(0.5%羧甲基纤维素钠)组、脑心通(900mg/kg)组、珍龙醒脑(100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg)组。每天给药一次,给药前禁食12小时不禁水,连续7天。于末次给药2小时,将小鼠后置于含有钠石灰的密封250ml广口瓶中,以呼吸停止为指标,观察记录死亡时间。动物置密封广口瓶中后,呼吸逐渐减弱,直至消失,动物死亡。用药后各组与空白对照组比较,动物存活时间有所延长,其中脑心通、珍龙醒脑高剂量组对照组相比,均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),能明显延长小鼠存活时间。说明珍龙醒脑可延长常压缺氧下小鼠的存活时间,提示珍龙醒脑具有抗缺氧作用。2珍龙醒脑对小鼠断头缺血缺氧的影响将小鼠随机分为空白(0.5%羧甲基纤维素钠)组、脑心通(900mg/kg)组、珍龙醒脑(100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg)组。每天给药一次,给药前禁食12小时不禁水,连续7天。于末次给药2小时,将小鼠断头,以张口为指标,观察喘息时间。结果动物被断头后,张口呼吸仍会持续,用药后,可以明显延长断头后呼吸维持时间。珍龙醒脑高剂量和中剂量组与对照组相比,均有统计学意义(P<0.05),能明显延长小鼠断头喘息时间。说明珍龙醒脑可明显延长小鼠断头喘息时间,有对抗脑缺氧的作用。二珍龙醒脑胶囊对结扎颈总动脉致小鼠脑缺血缺氧的影响将小鼠随机分为空白(假手术组,0.5%羧甲基纤维素钠)组、模型(0.5%羧甲基纤维素钠)组,脑心通(900mg/kg)组、珍龙醒脑(100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg)组。每天给药一次,给药前禁食12小时不禁水,连续7天。末次给药后2小时,小鼠麻醉后行双侧颈总动脉缺血再灌注手术,夹闭10min,再通10min,灌注2次。假手术组分离出颈总动脉并穿线操作后,不夹闭血管并恢复原状。术后24h断头取脑,在低温下分取左、右脑。取左脑称重后置80℃烘烤2小时,称干重,计算脑组织含水量。将右脑组织充分匀浆,测定SOD、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活力及MDA含量。结果显示:缺血24小时后,模型组小鼠脑含水量明显增加,珍龙醒脑有明显的降低脑含水量的作用。同时,模型组小鼠脑组织中MDA含量明显升高,SOD、Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase活力显著降低,珍龙醒脑可明显降低MDA含量,并升高SOD、Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase的活力。三珍龙醒脑对电刺激大鼠颈总动脉血栓形成的影响将大鼠随机分为空白(0.5%羧甲基纤维素钠)组、脑心通(900mg/kg)组、珍龙醒脑(100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg)组。每天给药一次,给药前禁食12小时不禁水,连续7天。末次给药后2小时,戊巴比妥钠麻醉,分离右侧颈总动脉,置好温敏探头和刺激电极,1.5mA×7min,观察血管阻塞时间。结果显示:刺激大鼠颈总动脉,内皮损伤,致血栓形成,阻塞血管。珍龙醒脑可明显延长血管阻塞时间。四珍龙醒脑对大鼠大脑中动脉缺血再灌注的影响将大鼠随即分为空白(0.5%羧甲基纤维素钠)组、模型(0.5%羧甲基纤维素钠)组、脑心通(900mg/kg)组、珍龙醒脑(100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg)组。每天给药一次,给药前禁食12小时不禁水,连续7天。末次给药后2小时,10%水合氯醛腹腔注射麻醉,分离颈总动脉,与颈总动脉近心段、结扎颈总动脉,颈外、颈内分叉近心端处用动脉夹夹闭,颈总动脉两结扎处剪口,将尼龙线插入并使进入颈内动脉,松开动脉夹。线栓两小时后,拉出尼龙线,造成再灌注模型,再灌注24小时后,进行神经行为学检查,脑指数及脑梗死体积(TTC染色)测定。结果显示:大脑中动脉缺血再灌注模型组动物可表现不同程度症状,致神经行为评分增加,珍龙醒脑可以明显改善动物行为,降低评分,降低脑指数和脑梗死范围。五珍龙醒脑对大鼠大脑中动脉缺血再灌注血小板聚集的影响将大鼠随即分为空白(0.5%羧甲基纤维素钠)组、脑心通(900mg/kg)组、珍龙醒脑(100mg/kg、200mg/kg、400mg/kg)组。每天给药一次,给药前禁食12小时不禁水,连续7天。末次给药后2小时,大鼠由腹主动脉取血,枸橼酸钠抗凝,由ADP诱导血小板聚集,观察聚集率。结果显示珍龙醒脑400mg/kg可明显抑制血小板的聚集。本研究发现,珍龙醒脑胶囊可以减轻脑缺氧及脑缺血再灌注损伤动物的脑水肿,缩小梗死体积,减轻症状。