目的:阿那曲唑是一种有效的、高选择性的第三代芳香酶抑制剂,主要用于绝经后妇女乳腺癌的治疗,应用广泛[1-3]。《美国药典》(USP36-NF31起至USP40-NF35)、EP9.2和《中国药典》(2015年版)二部[4]均收载了阿那曲唑原料药。由于阿那曲唑原料药是通过合成后精制获得,合成工艺的不同有可能产生不同的杂质,因此,必须对研制产品进行全面的质量考察。本实验针对自制的阿那曲唑原料药开展质量研究,对其中的有关物质检测方法进行了详尽的研究与改进[5-7],为提高阿那曲唑原料药的质量控制水平提供参考。方法和结果:本文通过外观、引湿性试验、溶解度试验、熔点测定,考察了阿那曲唑的性状;且考察了红外光谱鉴别、紫外光谱鉴别、液相保留时间、显色反应鉴别。其中,液相保留时间鉴别专属性强,而红外光谱证明与本品分子结构中的官能团一致,均是原料药有效的鉴别手段。本文根据阿那曲唑分子结构的特点与合成工艺的特点,采用色谱法考察其在生产过程中带入的原料、中间体、降解物、异构体、聚合体、副反应产物等有关物质。首先对美国药典USP36-NF31阿那曲唑质量标准中提到的色谱系统进行考察,采用起始物料,中间体,USP中的已知杂质在上述色谱条件下进行全波长扫描检测,分析了各成分的最大吸收波长,选择了 210nm/215nm为合适的检测波长,并考察了检测方法的专属性,专属性试验结果显示该色谱系统能有效分离并检出阿那曲唑原料药中的杂质。最终,根据上述选择结果,进行了方法学验证,验证参数包括方法专属性、检测限、定量限、溶液稳定性和有关物质的精密度,验证结果显示该检测方法符合各项测定要求。其次对2015版药典中阿那曲唑质量标准中提到的色谱系统进行考察并进行色谱系统的最优化获得“方法3”;根据最优化选择结果,进行了方法学验证,验证参数包括方法专属性、检测限、定量限、溶液稳定性和有关物质的精密度,验证结果显示该检测方法符合各项测定要求,并进行杂质归属。最后取成熟工艺合成的三批阿那曲唑原料药与原研产品及已上市的产品在两种色谱系统条件下比对检测结果,并根据最终的比对情况暂定“方法3”为本公司生产的阿那曲唑原料药有关物质检测用的色谱系统。后来,又对EP9.2阿那曲唑质量标准中提到的色谱系统进行考察,主要是考察了其中已知杂质的精密度,检测限,定量限,溶液稳定性,及对三批生产验证批样品进行杂质比对,可知在生产验证批当中不能检出EP9.2所述的已知杂质。阿那曲唑色谱系统的比对试验持续考察中,若近效期内的三批生产验证批样品今年不能检出EP9.2所述的已知杂质,则确定用方法3为本公司生产的阿那曲唑原料药有关物质检测用的色谱系统。因本品合成工艺中使用了乙腈,二氯甲烷,甲苯,异丙醇,正己烷,故采用气相色谱顶空进样法检查它们的残留量。分析方法学研究结果表明,方法的专属性、重复性、灵敏度、线性和准确度均符合测定要求。在此基础上检测三批成熟工艺样品中的有机溶剂残留量均符合药典要求。同时,根据本品的合成工艺,对无机杂质如炽灼残渣、重金属、砷盐、硫酸盐、氯化物、溴化物、氰化物等的检查也分别作了研究。根据本品的性质分别以滴定法及高效液相色谱法对比研究了阿那曲唑含量测定的方法,对分析方法进行了验证,包括线性与范围、精密度等,结果证明两种含量测定方法均可行,虽然滴定法精密度高但消耗样品量大,故选择HPLC法作为含量测定方法控制本品的含量。上述对阿那曲唑原料药的质量研究为控制产品质量和制订质量标准提供了实验数据,经过测定,中试三批样品AN091001、AN091101、AN091102的含量分别为 99.95%,99.82%,99.83%;中试三批样品 AN091001、AN091101、AN091102含有的有关物质主要为杂质I,其含量分别为0.04%,0.10%,0.01%;总杂质也为0.04%,0.10%,0.01%;且阿那曲唑原料药中的无机杂质均符合规定。最后,在科学的质量标准研究基础上,按照药典附录的要求,进行了阿那曲唑稳定性考察,包括影响因素试验、加速试验和长期稳定性试验。实验结果表明阿那曲唑样品在高湿、高温和光照下均稳定;加速试验6个月和长期稳定性36个月的结果也表明样品较为稳定。结论:通过对阿那曲唑原料药性状和鉴别试验的考察,确认高效液相色谱法及红外光谱法为有效的鉴别手段,并确认了其理化性质。通过对阿那曲唑原料药无机杂质、有机杂质及溶剂残留的检查,可知2015年版《中国药典》二部中阿那曲唑质量标准中提到的有关物质色谱系统最优化后获得的“方法3”可以有效控制阿那曲唑原料药的有关物质,且在此基础上获得的含量测定用色谱系统也能有效控制阿那曲唑原料药的含量。