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血吸虫病是一种存在广泛且危害严重的人畜共患寄生虫病。吡喹酮能杀死血吸虫成虫和尾蚴,是安全高效的治疗药物,但不能预防其感染。血吸虫病流行和传播的客观因素以及该病复燃的危险因素在某些地区仍然存在。新药和疫苗的研发仍然是该病防控技术研究的重点。东方田鼠是对日本血吸虫具有天然抗性的哺乳动物,对其抗性机制研究可为血吸虫病防控技术研究提供新的方向和线索。本文应用DMEM灌洗东方田鼠腹腔后快速水平振荡,分离培养并贴壁筛选纯化巨噬细胞,建立了一种东方田鼠腹腔巨噬细胞体外分离培养的简便方法。结果获得了大量高纯度的腹腔巨噬细胞,细胞形态正常,活细胞比例为98%。培养细胞吞噬墨汁颗粒功能的检测结果表明其具有良好的吞噬功能。细胞内酸性磷酸酶及非特异性α-醋酸奈酚酯酶染色结果显示获得的细胞胞质内含有较丰富的水解酶。结果表明快速震荡法是一种简易实用的体外分离培养东方田鼠腹腔巨噬细胞的方法。测定了东方田鼠感染日本血吸虫前后血清和肝肺组织中NO含量,结果显示感染0 d、3 d、7 d、15 d的东方田鼠血清NO含量呈上升趋势,分别为3.99μM、4.95μM、18.89μM、23.81μM,显著高于同时期BALB/c鼠血清。感染过程中东方田鼠和小鼠肝脏组织NO水平均呈下降趋势,差异不显著。感染0 d、3 d、7 d、15 d东方田鼠肺组织NO含量呈先上升后下降趋势并显著低于BALB/c鼠。分离培养的东方田鼠巨噬细胞产生的NO含量显著高于昆明(KM)鼠巨噬细胞,经过LPS或IFN-γ刺激后NO含量极显著地高于未刺激细胞或KM鼠巨噬细胞。荧光探针分析结果表明有NO分子活性的东方田鼠巨噬细胞比例大于KM鼠巨噬细胞。体外进行的童虫杀伤试验结果表明,东方田鼠正常血清+LPS刺激组24 h后可见童虫体表有大量细胞黏附,显著多于灭活血清组和未刺激的巨噬细胞组。东方田鼠正常血清+LPS刺激组对童虫的杀伤作用显著大于其它各组,添加了巨噬细胞后杀虫作用和未加巨噬细胞组相比有显著差异。结果表明东方田鼠巨噬细胞经刺激后可显著提高血清补体杀伤童虫效果。本文表达纯化了日本血吸虫补体结合蛋白rSjTOR-ed1和rSjC1qbp。补体溶血抑制试验结果显示,10μM rSjTOR-ed1和5μM rSjC1qbp融合蛋白对东方田鼠血清补体溶血抑制率分别为37.47%和81.73%,对昆明鼠血清的抑制率为55.61%和91.99%,差异极显著。结果说明日本血吸虫补体结合蛋白rSjTOR-ed1和rSjC1qbp对东方田鼠血清补体活性抑制作用低于对昆明鼠血清补体活性抑制作用,为解释补体在东方田鼠抗日本血吸虫机制中的作用提供了数据。本文结果为理解阐述东方田鼠抗日本血吸虫机制提供了数据。