地塞米松对小鼠骨骼肌Myomaker与MyoD基因表达的影响

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:chenda1982
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Myomaker是一种肌肉特异性跨膜蛋白,对肌细胞的融合至关重要,MyoD是肌肉发育和形成过程中的重要因子。在持续应激状况下,机体产生的过量的糖皮质激素造成肌肉萎缩,对机体的发育产生不利影响,为了研究过量的糖皮质激素作用于机体后,Myomaker和MyoD对机体的修复与再生作用,本研究中用地塞米松(人工合成的糖皮质激素)以20mg/kg/d剂量腹腔注射于小鼠体内,并用生理盐水作为对照,连续注射一周后分别在注射结束后的第一天、第四天、第七天和第十四天对小鼠的股四头肌进行采样,并通过免疫组织化学、qRT-PCR和Western blotting技术对Myomaker和MyoD基因的表达进行检测。结果表明:(1)通过PCR方法在健康成年小鼠骨骼肌中扩增到Myomaker基因CDS区,并且测序结果与NCBI上Myomaker基因的登录序列相同,进一步通过免疫组织化学和Western blotting试验证实Myomaker蛋白在健康成年小鼠骨骼肌中存在表达。(2)Myomaker蛋白主要表达于肌细胞膜上,MyoD蛋白主要存在于细胞核里。光密度分析结果表明,在处理后一天,Myomaker蛋白的表达量较弱,MyoD蛋白表达量较强,在处理后第四天,二者的表达均显著增加,之后维持在正常水平。(3)在地塞米松处理后第一天,Myomaker mRNA和蛋白表达显著降低,MyoD mRNA和蛋白表达有升高趋势,在处理后第四天Myomaker与MyoD基因mRNA和蛋白的表达均明显增加,之后维持在正常水平。结论:Myomaker基因在健康成年小鼠骨骼肌中存在表达。在地塞米松连续处理一周后的第四天,Myomaker和MyoD二者的表达量均明显升高,表明地塞米松处理后能够促进Myomaker和MyoD的表达,以为可能发生的肌肉再生做出适应性准备。
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