口蹄疫病毒O型(缅甸98系)毒种筛选及其灭活疫苗免疫效果研究

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口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease,FMD)是由口蹄疫病毒引起的猪、牛、羊等偶蹄动物的一种烈性传染病,给流行国家和地区带来严重的经济损失,筛选与田间流行毒株基因型相近的、免疫原性良好的、适合生产特性的制造疫苗毒株,将对疫情的有效控制会起到非常重要的作用。本论文针对中国农业科学院国家口蹄疫参考实验室分离鉴定的四株东南亚拓扑型缅甸98系O型口蹄疫乳鼠毒,开展了实验室乳鼠传代、实验室方瓶细胞传代驯化、生产车间细胞转瓶培养传代适应以及制作疫苗的评价工作;根据以上三阶段毒种传代过程中的收毒时间、病毒含量以及对靶动物和靶细胞的适应情况,选择出一株传代稳定、病毒含量较高的适合生产的疫苗种毒株—O/XJ/10-11株。经传代培养后,将收获的S01、S02、S03三批次病毒液分别按照工艺要求进行灭活处理,制成灭活疫苗(期间进行灭活效果检验、成品性状检验、成品安全检验等),与现行经典的OZK/93株制作的3批疫苗同时免疫经筛选的易感动物猪,在同等条件下饲养,比较疫苗免疫后28天供试猪血清抗体效价,并进行疫苗交叉攻毒保护试验,初步评估两种疫苗的免疫效果。结果显示,两种疫苗免疫动物后,都可刺激机体产生较高抗体水平,其中S01批O/XJ/10-11株灭活疫苗免疫组猪的抗体滴度<1:4的占10%,1:4~1:45的占65%,≥1:64的占25%;对照OZK/93株灭活疫苗(1)免疫组猪的抗体滴度<1:4的占5%,1:4~1:45的占60%,≥1:64的占35%;S02批O/XJ/10-11株灭活疫苗免疫组猪的抗体滴度<1:4的占15%,1:4~1:45的占45%,≥1:64的占40%;对照OZK/93株灭活疫苗(2)免疫组猪的抗体滴度<1:4的占15%,1:4~1:45的占80%,≥1:64的占5%;S03批O/XJ/10-11株灭活疫苗免疫组猪的抗体滴度<1:4的占10%,1:4~1:45的占35%,≥1:64的占55%;对照OZK/93株灭活疫苗(3)免疫组猪的抗体滴度<1:4的为0,1:4~1:45的占50%,≥1:64的占50%;O/XJ/10-11株灭活疫苗免疫的猪只,用同源毒株和OZK/93毒株进行攻毒,保护率均可以达到80%以上;OZK/93株灭活疫苗免疫猪只,用其同源毒株攻毒的保护率可达到80%以上,但对O/XJ/10-11株攻毒保护率最高仅为60%。分析表明,在免疫剂量相同的前提下,O/XJ/10-11株灭活疫苗免疫效果与OZK/93株灭活疫苗相当,而交叉保护力明显强于OZK/93株灭活疫苗。综上,使用东南亚拓扑型缅甸98系O型口蹄疫病毒毒株可替代经典的OZK/93毒株进行猪口蹄疫O型灭活疫苗的生产。
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