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第一部分不同浓度抗磷脂抗体对外周血单个核细胞中Th细胞亚型表达的调节目的：探讨不同浓度aPL抗体对外周血中Th1、Th2、Th17、Treg细胞调节作用。方法：分离健康人外周血单个核细胞,与不同浓度的抗磷脂抗体共同培养孵育48小时后,检测外周血单个核细胞中Th1、Th2、Th17、 Treg四种亚型的表达。我们采用流式细胞检测技术直接从数量上检测抗磷脂抗体干预后的Th1、Th2、Th17、Treg四种亚型细胞分化情况,并通过实时定量PCR检测转录因子的表达,从Th细胞分化的上游过程中探讨抗磷脂抗体干预后的Th1、Th2、Th17、Treg四种亚型细胞分化状态。结果：本研究发现aPL干预后Th1细胞及其T-bet mRNA表达均出现下调；Th2细胞及其GATA3mRNA表达上调,Th1/Th2比值下降,平衡向Th2偏移；Th17细胞及其ROR-γ t mRNA表达上调,Treg细胞及其Foxp3mRNA表达下调,Th17/Treg失衡。且本实验发现Th细胞亚型变化与aPL抗体浓度相关,高浓度的aPL抗体导致Th细胞亚型分化的紊乱。结论：1.aPL导致PBMCs中Th1、Th2、Th17、Treg细胞表达发生改变,导致Th1/Th2失衡,Th17/Treg失衡,导致免疫紊乱,可能参与aPL介导的组织损伤。2.Th细胞亚型变化与aPL浓度存在剂量关系。第二部分探讨抗磷脂抗体对外周血单个核细胞表达协同刺激分子PD-L1的影响目的：探讨不同浓度抗磷脂抗体对协同刺激分子PD-L1表达的调节作用以及PD-L1在aPL导致Th细胞亚型分化紊乱中的作用。方法：分离健康人外周血单个核细胞,与不同浓度的抗磷脂抗体共同培养孵育48小时后,检测采用流式细胞技术检测外周血单个核细胞中PD-L1蛋白表达强度,并通过实时定量PCR检测PD-L1mRNA转录因子的表达。同时分析PD-L1表达与Th细胞分化的相关情况。观察并比较经PD-L1-Ig预处理后,致病浓度的aPL抗体对Th1、Th2、 Th17、Treg四种Th亚型细胞分化的影响。结果：本研究发现aPL干预后PD-L1蛋白及mRNA表达均呈上调趋势,各组间表达有统计学差异(F=9.391,p=0.000；F=15.344,p=0.000),且上调与抗体浓度显著正相关(r=0.713,p=0.000；r=0.756,p=0.000)。PD-L1蛋白表达与Th1细胞,Treg细胞以及Thl/Th2比例负相关,而与Th2细胞及Th17细胞表达无相关性。而PD-L1mRNA表达与T-bet mRNA, Foxp3mRNA以及T-bet/GATA3比例显著负相关,与GATA3mRNA及ROR-γ t mRNA表达显著正相关。但是给予PD-L1-Ig阻断协同刺激信号通路后,研究发现高浓度的aPL组与阻断抗体组Th细胞亚型变化无显著差异(p>0.05)。结论：1.aPL可导致PD-L1表达上调,且与抗体浓度正相关。协同刺激分子PD-L1可能在APS发病中发挥作用。2.协同刺激分子PD-L1可能在aPL导致的Th细胞分化紊乱中发挥作用。3.抑制PD-L1协同刺激信号通路对Th亚型分化无明显影响。第三部分卡介菌多糖核酸对aPL干预后的PBMGs中Th细胞亚型的影响目的：探讨卡介菌多糖核酸治疗APS的可能机制方法：分离健康人外周血单个核细胞,与致病浓度的抗磷脂抗体、治疗浓度的卡介菌多糖核酸溶液共同培养孵育48小时后,采用流式细胞技术检测外周血单个核细胞中Th1、Th2、Th17、Treg四种Th亚型细胞表达情况,并通过实时定量PCR检测Th1、Th2、Th17、Treg四种Th亚型细胞mRNA表达的变化情况。结果：本研究发现卡介菌多糖核酸溶液干预后Thl细胞及其T-bet mRNA表达均出现显著上调(p=0.000；p=0.000)；Th2细胞及其GATA3mRNA表达变化无统计学差异(p>0.05)；Th1/Th2比值上调,平衡向Th1偏移。Treg细胞及其Foxp3mRNA表达上调,均有统计学差异(p=0.016；p=0.024)；而Th17细胞及其ROR-γt mRNA表达无统计学差异(p>0.05)。结论：卡介菌多糖核酸溶液可以有效逆转Th细胞的分化,卡介菌多糖核酸溶液可能在临床治疗APS中发挥作用。