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目的:Intermedin[IMD,又称肾上腺髓质素-2(ADM-2)]能够通过抑制肾组织局部的氧化应激来减轻肾脏纤维化,但是确切机制尚不清楚。血红素加氧酶-1(HO-1)具有抗纤维化作用。既往有研究表明,与IMD同源、结构和功能类似的ADM可以诱导HO-1产生。但IMD对HO-1是否有影响目前尚未见报道。本实验通过研究IMD对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠及大鼠近端小管上皮细胞系(NRK-52E)HO-1的影响,阐明IMD是否通过诱导HO-1减轻肾纤维化。方法:用雄性Wistar大鼠制作UUO模型诱导肾纤维化。用重组人转化生长因子-β1(rhTGF-β1,10ng/ml)刺激NRK-52E以建立体外上皮-间充质转分化(EMT)模型。将质粒pcDNA3.1-IMD转染UUO大鼠梗阻侧肾脏组织和NRK-52E,使IMD高表达。用锌原卟啉(ZnPP)抑制HO-1酶活性,观察IMD是否通过抑制HO-1起到肾脏保护作用。用定量RT-PCR、Western blot法或免疫组织化学法检测IMD对HO-1表达的影响。通过胆红素的产生量来测定HO活性。Masson染色观察肾脏病理改变并进行半定量分析,用RT-PCR法检测胶原蛋白I的mRNA表达,用Western blot法检测其蛋白质表达。通过免疫组织化学法分析巨噬细胞浸润和IL-6表达的情况,以评估炎症反应。通过Western blot法及免疫荧光法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙粘蛋白表达来评估EMT。结果:转染IMD基因的UUO大鼠梗阻侧肾脏和NRK-52E中HO-1表达和HO活性增加,说明IMD能诱导HO-1。UUO模型梗阻侧肾脏在术后第7 d表现出明显的间质纤维化,IMD基因转染的UUO大鼠梗阻侧肾脏间质纤维化程度明显减轻。UUO大鼠梗阻侧肾脏有大量巨噬细胞浸润,IL-6表达明显升高,转染IMD后能抑制巨噬细胞的浸润和IL-6的表达,说明IMD能抑制肾脏局部炎症反应。UUO大鼠的梗阻侧肾脏和NRK-52E中E-钙粘蛋白的表达下调,同时α-SMA的表达增加,表明发生了EMT,IMD基因转染能抑制EMT。HO活性抑制剂ZnPP能阻断IMD的肾脏保护作用。结论:IMD可以通过诱导HO-1来减轻肾脏纤维化。