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研究目的:研究力竭运动及钝挫伤对大鼠骨骼肌卫星细胞及Pax7/转录因子(CBF1)/γ-serectase分泌酶抑制剂(DAPT)的影响,探究骨骼肌损伤的修复机制。研究方法:实验选取24只五周龄SD雄性大鼠,随机分为4组,每组6只,分别是力竭运动组(Exhaustive Exercise Group, E,3组×6只)和安静对照组(Control, C,1组×6只),其中力竭运动组各组分别进行一次力竭性下坡跑运动达到力竭状态,并按照宰杀时间分别标注为力竭即刻组(Exhaustive, EO),力竭后24h组(E24)和力竭后48h组(E48)。另外依旧选取18只五周龄SD雄性大鼠随机分(3组×6只)作为钝挫伤组(Contusion Group, D),对各组依次进行重物击打钝挫,同样按照宰杀时间分别标注为钝挫伤即刻组(DO),钝挫伤后24h组(D24)和钝挫伤后48h组(D48)。在安静的状态下采用20%乌拉坦对安静对照组,力竭运动组和钝挫伤组于不同的时间间隔分别进行腹腔注射麻醉,宰杀取血制备血清,并取下右侧腓肠肌,将腓肠肌一分为二,一份立即进行细胞培养实验,另一份和血清一起在-80℃冰箱保存,用ELISA法检测Pax7、CBF1、DAPT的含量变化。另取新生3日龄鼠3只,宰杀后同样取右侧腓肠肌进行细胞培养实验。实验结果:(1)根据肌卫星细胞培养实验结果显示:经过对骨骼肌进行分离处理和纯化:等一系列体外培养后,体外获得高纯度的肌卫星细胞。观察在肌卫星细胞培养的初期,除.新生鼠组外各组卫星细胞增殖均处于缓慢状态,从第五天开始大量增殖,到第七天均达到各自增殖的高峰期,之后增殖速度便开始慢慢下降。各组对比显示:安静对照组细胞增殖最为缓慢且数量也最少,钝挫伤组与力竭运动组均增殖迅速且含量较多,但细研之,两组之间还是有明显的差异,即钝挫伤组的增殖速度和数量要比力竭运动组高。另外新生鼠组的骨骼肌卫星细胞培养结果与各组比较,含量最高且增殖速度最快。培养第二天便可见少量梭形细胞,之后开始大量增殖,培养第五天可见到有少数卫星细胞相互融合形成具有中央细胞核的肌管。(2) Elisa结果显示:力竭运动组和钝挫伤组各组骨骼肌、血清中Pax7和CBF1的含量与对照组相比均显著上升,且具有显著性差异(P<0.05);DAPT在各组骨骼肌、血清中的含量与对照组相比均显著下降,且具有显著性差异(P<0.05)。而力竭运动组和钝挫伤组之间无显著性差异。结论:(1)对比各组肌卫星细胞的增殖情况发现:安静对照组无明显增殖现象,而在新生鼠在未受任何外界刺激的作用下体内卫星细胞的增殖含量和速度都是最高的,说明肌卫星细胞在新生鼠体内本身就处于激活和分化的状态。钝挫伤组和力竭运动组增殖速度和数量介于对照组和新生鼠之间,但钝挫伤对于肌卫星细胞的激活程度更为强烈,说明钝挫伤对肌肉的损伤程度要大于力竭运动。(2)力竭运动和钝挫伤可以促进Pax7和CBF1的含量上升,但下调DAPT的含量。Pax7和CBF1可能在骨骼肌卫星细胞激活及骨骼肌损伤修复中起着正向调节的作用,而DAPT可能起着负向调节作用。