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本论文通过试验建立了黄河蜜甜瓜植株再生体系,在愈伤组织水平上,利用土壤农杆菌对来源于实生苗的外植体进行CMV CP基因遗传转化,首次通过农杆菌介导将黄瓜花叶病毒外壳蛋白(CMV CP)基因转入黄河蜜甜瓜植株内。通过PCR-Southern证明获得了转基因植株。 以子叶和下胚轴为外植体,都能不同程度地诱导出愈伤组织,并得到再生植株,但子叶优于下胚轴。子叶以MS+6-BA0.4mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L培养基上诱导愈伤组织效果最好,诱导率高达97.1%,以MS+6.BA1.5mg/L+蔗糖30g/L培养基次之,诱导率为87.2%,以MS+6-BA2.0mg/+2,4-D0.2mg/+蔗糖30g/L最差。芽分化过程中,以MS+6-BA0.8mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖30g/L培养基最理想,平均芽分化数为10.8个,芽在伸长过程中黑暗处理2天,利于生根,在1/2MS+IAA0.2mg/L+蔗糖20g/L培养基上诱导生根效果最佳,生根率可达73.2%;下胚轴以MS+6.BA0.4 mg/L+NAA1.0 mg/L+蔗糖30g/培养基诱导愈伤组织效果最佳,诱导率为86.4%,以MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D0.2mg/L+蔗糖30g/L培养基次之,诱导率为73.8%,以MS+6-BA1.5mg/L+蔗糖30g/L培养基最差。芽分化以MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30g/L培养基最好,平均每块愈伤组织分化的芽数为9.4个,芽在伸长过程中经过黑暗处理2天,利于生根,在1/2MS+IAA0.5mg/L+蔗糖20g/L培养基上诱导生根效果最理想,生根率为67.2%。 利用整合有CMV CP基因以及Kan抗性基因、NPT-Ⅱ为报告基因的改建质粒pBin438,以农杆菌为载体,对黄河蜜甜瓜子叶和下胚轴进行了转化。通过试验确定Carb500mg/L能有效地抑制农杆菌的生长,Kan100mg/L是最佳选择压。预培养时间、AS浓度、供试菌株的生理活性和NAA浓度均影响转化率,子叶外植体预培养2天可以显著提高转化效率,在共培养时加入AS40umol/L可以提高转化率2.1%,用pH5.6的YEP液活化供试菌株,转化效果较好,NAA浓度子叶以0.1mg/L、下胚轴以1.0mg/L有利于转化,本转化系统获得愈伤组织最高转化率为12.8%。最终得到了Kan的抗性愈伤组织,经过对Kan~r愈伤组织的诱导分化,获得了完整的转化植株。PCR检测结果表明,转基因黄河蜜甜瓜植株已整合了CMV CP基因。