随着2013年治疗乳腺癌的kadcyla被FDA批准上市,ADC药物得到了飞速发展。到目前为止,已经有四种ADC药物获准上市,市场非常广阔。但是ADC药物在血浆中必须保持足够的稳定性,进入肿瘤细胞后又必须快速准确地释放出来,因此对ADC药物的质量提出了很高的要求。而ADC药物的偶联工艺更是保证ADC药物质量标准的最重要环节之一。本课题着重研究抗Her2抗体偶联药物的偶联工艺开发,并探索了ADC药物的偶联工艺的影响因素。本文主要利用化学偶联方法将抗her2抗体的赖氨酸残基与小分子细胞毒素DM1通过SMCC相连接,研究了影响最终关键质量属性药物抗体连接比例（DAR值）和SEC-HPLC单体纯度的关键因素,并通过实验设计（DOE）确定实验计划,模拟出相应的分析模型。通过对方差、误差统计和残差的分析验证了模型的可靠性,并通过等高线图和3D曲面图分析各个关键影响因素的权重,最终通过模型模拟出优选条件,并加以验证。首先,我们将抗体的赖氨酸残基与SMCC相接,通过分析发现反应时间、反应p H值和抗体与SMCC的比例是影响DAR值的三个影响因素。通过响应面法进行实验设计,根据结果得知SMCC与抗体的摩尔浓度比对结果影响最大,其次是反应时间,最后是反应p H值。初步选定反应p H 6.0,反应时间100分钟,SMCC与抗体的摩尔浓度比为8作为第一步的反应条件。接下来,将第一步的产物与小分子毒素DM1相连,通过分析发现反应p H值、反应时间和DM1与抗体的摩尔比对最终产品的抗体偶联比例和SEC-HPLC单体纯度都有影响。通过响应面法进行试验设计,根据结果得知,对于DAR值而言,反应p H值影响最大,其次是反应时间,而DM1与抗体的摩尔比在限定范围内对结果影响不是很大。而对于最终产品的SEC-HPLC单体纯度而言,反应p H值影响最大,反应时间和DM1与抗体的摩尔比对结果影响都不是很大。综合两方面的结果,选定反应p H 5.2,反应时间5小时（300分钟）,DM1与抗体的摩尔浓度比为7.3作为第二步的反应条件。将得到的第一步和第二步的反应条件进行三次平行验证试验,最终的UV-DAR值为3.52,SEC-HPLC单体纯度为98.8%,符合设定的质量要求。