论文部分内容阅读
目的:研究ELISA法检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体诊断阳性的最佳Cut-off值及比较国内常用四种试剂的敏感性和特异性。方法:1.高、低浓度的质控品,平行检测20次,计算批内精密度变异系数(CV),并高、低浓度的质控品,每天检测复孔,连续检测20天,计算批间精密度CV。2.选取2013年11月至2014年4月来我院住院患者或体检者血清或血浆经ELISA法初筛HCV抗体阳性的标本130例和接近临界值(阴性)标本45例(OD=0.15-2)。利用重组免疫印迹法(RIBA/PCR)确认所有标本的阴性或阳性。3.判断在试剂盒提供的Cut-off值的条件下,ELISA法与RIBA法检测结果的一致性的Kappa值及ELISA法检测HCV抗体的敏感性和特异性。4.利用SPSS17.0统计软件绘制ROC曲线,选取最大的切点为临界点,并计算新的Cut-off值时,ELISA法检测结果与RIBA法结果的一致性Kappa值及ELISA法检测HCV抗体的敏感性和特异性。5.选取实验室常用的四种试剂无序的编为A、B、C、D,在四种试剂检测前评估评价批内精密度CV和批间精密度CV,满足实验室要求后,四种试剂分别检测经RIBA法确认后的参考血清,计算A、B、C、D试剂的敏感性和特异性,并比较四种试剂检测敏感性和特异性有无差异。结果:1.高、低浓度的质控品批内精密度分别为9.58%和10.08%,批间精密度分别为12.08%和13.78%。2.两种检测结果的一致性Kappa值为0.676,ELISA法检测的敏感性为98.17%,特异性为65.16%,此时,两种检测方法有统计学差异(P<0.05)。3.利用ROC曲线确定的CO的临界值Cut-off值为0.252,此时,两种检测方法结果的一致性Kappa值为0.829。ELISA法检测的敏感性为94.50%,特异性为89.39%,此时,两种检测方法无统计学差异(P>0.05)。4.利用ROC曲线确定S/CO的临界值是2.44,此时的敏感性为93.6%,特异性为96.1%。5.四种试剂检测前,评估的批内精密度CV为9.82%,批间精密度CV为13.17%。6.A试剂的敏感性为99.08%,特异性为72.73%。B试剂的敏感性为99.08%,特异性为75.76%。C试剂的敏感性为99.08%,特异性为72.73%。D试剂的敏感性为99.08%,特异性为74.24%。且四种试剂间的敏感性、特异性无统计学差异(P>0.05)。结论:1.试剂说明书提供的Cut-off值可能与实验室实际Cut-off值存在差异。2.通过ROC曲线确定合适的Cut-off值,能有效的降低标本检测的假阳性率,能够为临床提供可靠的结果。3.国产试剂通常有较高的敏感性,不同的试剂间检测的敏感性和特异性不同。4.建议不同的实验室应根据所用的试剂,建立适合的Cut-off值,以减少标本的漏诊和误诊。