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目的:本研究通过免疫组化评估和分析乳腺癌患者原发灶和骨转移灶中四个关键免疫检查点（Siglec-15、PD-1、PD-L1和PD-L2）的不同表达,并分析它们的差异性表达与患者的临床病理学参数之间的关系,通过数据对比分析评估靶向治疗是否能提高乳腺癌患者的生存期,并为乳腺癌患者的靶向治疗提供一定的参考意义。方法:选取青岛大学附属医院2009年10月-2020年8月诊断为乳腺癌以及乳腺癌骨转移的94例患者,选取样本为活检或手术切除的肿瘤组织,制成切片,每张切片需要至少100个肿瘤细胞,用相关抗体进行染色,包括60例乳腺癌原发病灶标本,50例乳腺癌骨转移病灶标本,其中16例包括原发病灶和骨转移灶配对标本,详细归纳整理其临床病理资料。采用抗Siglec-15单克隆抗体、抗PD-1单克隆抗体、抗PD-L1单克隆抗体和抗PD-L2单克隆抗体分别进行1:200 IHC染色,分别检测Siglec-15、PD-1、PD-L1和PD-L2的阳性信号。并分析四个免疫检查点的表达与临床病理参数之间的关系,并分析它们的表达与乳腺癌骨转移患者的PFS与OS之间的相关性。用SPSS 22.0进行卡方检验和非参数检验用于比较各种分类变量之间的相关性,分析各种数据之间的统计学差异,各种计数资料采用数+百分比的方式呈现,对于PFS和OS的分析,患者的生存时间我们采用Kaplan-Meier法分析,并进行Log-rank检验;采用K-M单因素分析和Cox比例危险回归模型,并以95%的可信区间对各种免疫靶点的表达结果对生存期的长短进行单因素分析。在所有结果中,P<0.05（双侧）被认为是有统计学意义的。结果:1.在全部原发灶（N=60）中,有23例（38.3%）患者Siglec-15表达为阳性,另外有20例（33.3%）患者PD-L1表达为阳性,有19例（31.7%）和17例（28.3%）患者检测到PD-1和PD-L2阳性;在全部的骨转移灶（N=50）中,其中22例（44.0%）患者Siglec-15表达为阳性,17例（34.0%）和16例患者（32.0%）检测到PD-1和PD-L1阳性,有15例患者（30.0%）检测到PD-L2表达。2.Siglec-15阳性表达与乳腺癌分子类型（P=0.002）、病理学类型（P=0.033）有关,并且与PR（P=0.002）、ER（P=0.029）、HER-2（P=0.000）的表达也有关联。PD-1阳性与分子类型（P=0.001）、淋巴结转移（P=0.012）、PR（P=0.023）、ER（P=0.000）、HER-2（P=0.041）的表达有关。PD-L1的表达仅与分子类型（P=0.001）、ER（P=0.012）的表达有关,而与PR（P=0.056）和HER-2（P=0.208）的表达无统计学关系。PD-L2的表达与分子类型（P=0.000）、病理学类型（P=0.043）、淋巴结转移（P=0.000）有关,并且与PR（P=0.039）、HER-2（P=0.002）的表达也有关联,但是与ER（P=0.052）的表达之间无显著统计学差异。可见Siglec-15、PD-1、PD-L1、PD-L2的表达在乳腺癌患者不同的分子类型中存在明显的差异性。3.在配对患者中Siglec-15表达的一致率为31.3%,（5/16,Kappa=0.613,p=0.013）,原发灶和骨转移灶之间有显著表达差异（=0.333,p=0.013）。同时,PD-1表达的一致性率仅为12.5%（2/16,Kappa=0.034,p=0.889）,原发灶与骨转移灶之间无统计学表达差异（=0.143,p=0.889）。PD-L1表达的一致性率也仅为18.8%（3/16,Kappa=0.310,p=0.210）,原发灶与骨转移灶同样没有统计学表达差异（=0.200,p=0.210）。而对于PD-L2,符合率为25.0%（4/16,Kappa=0.846,p=0.001）,原发灶与骨转移灶之间也有显著表达差异（=1.000,p=0.001）。4.在50例乳腺癌骨转移患者中（N=50）,Siglec-15表达阳性患者的中位PFS和OS分别为18.60和23.40个月,其中Siglec-15在骨转移灶中的表达与OS一定的相关性（HR=1.82,95%可信区间为0.83-4.00,p=0.04）,而与患者的PFS没有明显的统计学意义。然而,PD-1和PD-L1的表达与乳腺癌患者的PFS和OS没有明显的关联。对于PD-L2表达阳性的患者来说,中位PFS和OS分别为21.75和22.75个月,PD-L2的阳性表达与他们的OS密切相关（HR=2.32,95%可信区间为0.86-6.22,p=0.03）,可见,Siglec-15和PD-L2在骨转移灶中的表达与患者的OS呈现负相关。结论:1.Siglec-15、PD-1、PD-L1、PD-L2在乳腺癌原发灶和骨转移灶中都有表达,其中Siglec-15的表达率最高;Siglec-15、PD-1和PD-L2在乳腺癌骨转移标本中的表达都高于原发灶,而PD-L1则在原发灶中表达较高。2.Siglec-15、PD-1、PD-L1、PD-L2的表达在乳腺癌患者的不同分子类型中存在明显的差异性。Siglec-15和PD-L2在三阴性乳腺癌中表达最高,而PD-1和PD-L1则在Luminal B型中表达最高。3.在配对患者中,Siglec-15和PD-L2在原发灶与骨转移灶中表达有显著差异,而PD-1和PD-L1的表达则无明显差异,说明Siglec-15和PD-L2可能促进乳腺癌晚期发生骨转移。4.Siglec-15和PD-L2在骨转移灶中的表达与患者的OS呈现负相关,而与患者的PFS没有明显的统计学意义,说明Siglec-15和PD-L2对于预测乳腺癌患者的生存期有重要的意义,并有可能作为乳腺癌骨转移患者治疗的可靠靶点。