研究背景:急性创面愈合是外科工作中常见而重要的过程,创面愈合受多种局部因素或全身条件的共同影响,然而在目前的临床实践中,急性创面的愈合却缺乏安全有效的治疗方法。外泌体在细胞间信号传递、细胞调控方面发挥着重要作用,外泌体中存在一类外泌蛋白CTHRC1,有报道称此类蛋白可以促进各类组织的愈合。TBC1D3是一种人类特异性基因,可以调控外泌体的释放。研究目的:研究外泌体及其中的CTHRC1蛋白对急性创面愈合的影响及其机制,探索TBC1D3对外泌体的调控作用并分析其分子机制。研究方法:我们首先应用聚乙烯醇海绵内植物(PVA)小鼠模型以模拟创面修复内环境并将其作为创面外泌体的来源,对外泌体进行收集和分析;体外试验验证外泌体与CTHRC1蛋白的功能和安全性;应用小鼠创面模型分别对外泌体和CTHRC1促进愈合作用进行评估,并应用蛋白组学分析、流式细胞技术、Western Blot和PCR等技术对PVA中细胞、细胞因子及外泌体进行分析,之后应用GSI小鼠以探索CTHRC1的作用机制;最后应用慢病毒转染和获得性转移技术,明确TBC1D3在体内外对外泌体释放的调控作用和作用机制。研究结果:小鼠PVA模型可作为可靠的创面外泌体的来源,外泌体中包括CTHRC1;创面来源外泌体可以提高细胞内膜活性相关蛋白的表达;重组CTHRC1蛋白可以在不影响增殖情况下增加永生化人类上皮细胞(HaCaT)的迁移能力,同时外泌体和安全剂量内的重组CTHRC1蛋白可以明显增加创面愈合的速度;创面外泌体和CTHRC1增加了在PVA内植物中的M2巨噬细胞的数量,CTHRC1激活了TGF-β和Notch通路,GSI小鼠对Notch通路的阻滞则减弱了CTHRC1的生物学功能。转染TBC1D3改变了EV负载,其介导释放的EV减缓了创面愈合速度,TBC1D3介导释放的EV减少目标细胞p-STAT3水平。研究结论:创面来源外泌体可促进创面愈合;创面外泌体中CTHRC1通过激活TGF-β和Notch通路,增加创面修复中的M2巨噬细胞,促进创面愈合的修复;TBC1D3可调控外泌体的负载和释放。