目的：乙型肝炎病毒(Hepatitis B vires HBV)是很小的包膜病毒，HBV-DNA和HBV特异P蛋白由核壳包裹成为核心颗粒，再由含HBsAg的脂蛋白外膜包裹成完整的病毒颗粒。病毒基因组是3.2kb的部分双链DNA，为嗜肝病毒，它的感染可造成乙型肝炎的发生。进一步可发生肝硬化、肝细胞癌等终末期肝病，严重危害人类健康。 采取临床慢性乙型肝炎患者外周血，分离树突细胞，进行体外培养、扩增后以表面抗原负载制备成特异的DC疫苗，行自体回输。观察患者肝功能、HBV-DNA等指标的变化，同时以酶联免疫技术分别检测DC疫苗治疗前后患者体内Th1/Th2水平的变化，Th1选取INF-γ代表，Th2选取IL-4为代表，判定DC疫苗治疗慢性乙型肝炎的疗效。测定DC疫苗治疗后患者体内ICAM-1及ICAM-3的水平，比较疗效存在差异者上述两因子的血清水平，判定其是否为DC疫苗治疗效应的影响因子。为临床乙型肝炎的免疫治疗提供理论依据。 方法：选取2004年5月-2007年5月河北医科大学第一医院肝病中心门诊或住院慢性乙型肝炎患者37例，其中男性30例，女性7例，年龄18岁-63岁，平均(37)岁。入选患者无其它肝炎病毒合并感染及严重并发症，DC治疗前半年内未进行过干扰素或核苷类似物的药物治疗，全部获得了知情同意。诊断标准符合2000年修订的《病毒性肝炎防治方案》及2005《慢性乙型肝炎防治指南》。采用自身前后对照试验，在无菌条件下抽取受试者外周静脉血20ml，肝素抗凝，在百级试验室进行下面操作：生理盐水1:1稀释抗凝血，层加到淋巴细胞分离液2000r/min离心30min，分离出外周血单核细胞并计数，用1640液洗2次，再加入含有体积分数150ml/L人AB血清的1640完全培养基重悬细胞，以2×109/L的细胞浓度加入一次性6孔培养板中，于37℃50ml/LCO2饱和湿度下培养4h，弃上清液，再用1640培养液轻洗2次，除去非贴壁细胞，加入含8335μkat/LrhGM-CSF和8335μkat/LrhIL-4的完全培养基，隔日换液，培养至第6天再加入终浓度为2.5mg/L的HBsAg，4h后加入终浓度为10μg/L的TNF，继续在37℃50ml/LCO2饱和湿度下培养1d，收获DC用生理盐水洗涤2次并计数，即刻在受试者腋下部位常规消毒后经皮下注入体内。同时取细胞沈液做无菌实验。回输2次为一个疗程(间隔2wk)，每位患者均治疗2个疗程。分别检测治疗前及治疗结束1月后的肝功能、HBV-DNA。留取患者治疗前及治疗1月后的血清，冻存于-80℃冰箱，集中检测IL-4、IFN-γ。同时检测治疗后患者血清的ICAM-1、ICAM-3，检测步骤严格按试剂说明书的检测步骤进行。在回输治疗前后检测指标一致的基础上，对DC疫苗治疗慢性乙型肝炎做自身比较。结果： 1.治疗前后患者生化学指标：ALT、AST在治疗后明显下降，有统计学意义P＜0.001(表1)。 2.治疗前后患者病毒学指标：DC治疗前后HBV-DNA下降大于2.01og10的19例，有效率：51.4％。(表2) 3 治疗前后患者血清Th1/Th2血清表达水平(表3)：DC治疗后IFN-γ明显升高，t=3.51，P＜0.0001，有统计学意义。IL-4治疗后明显下降，t=2.12，P=0.03，＜0.05，有统计学意义。 4 治疗后患者疗效及血清ICAM-1、ICAM-3水平(表4、5)：DC治疗后有效者19例，无效者18例，有效与无效两组间ICAM-1、ICAM-3比较，ICAM-1方差齐性检验：P=0.1372，＞0.1，t检验：t=0.33，DF=3 1，P=0.7421，＞0.05。ICAM-3方差齐性检验：P=0.1223，＞0.1，t检验：t=1.49，DF=31，P=0.1475，＞0.05，无统计学意义。 结论： 乙型肝炎患者慢性化的主要原因是细胞免疫功能降低，不能有效清除机体内的乙型肝炎病毒，分离患者自身外周血中的DC，行体外培养、扩增后以HBsAg负载制备成特异性DC疫苗行自体回输，可有效提高患者APC的提呈功能，有效改善Th1/Th2的失衡，促进Th1型细胞因子的分泌，反向抑制Th2型细胞因子的分泌，Th1型细胞因子占优势可有效激活并促进细胞免疫，促进病毒的清除。 ICAM-1及ICAM-3对DC疫苗治疗慢性乙型肝炎的疗效在理论上应有一定的影响作用。病毒学应答好与应答较差者ICAM-1及ICAM-3的血清水平应存在差异，而在本试验DC治疗后血清中ICAM-1、ICAM-3在有效与无效两组间比较无明显差异。