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目的:探讨并比较Ghrelin及其拟似剂生长激素释放肽-6(GHRP-6)对豚鼠胃平滑肌舒缩活动的影响及机制。
方法:采用电场刺激豚鼠胃底和胃窦部肌间神经方法,观察Ghrelin和GHRP-6对胃平滑肌舒缩活动的影响,并通过观察一氧化氮合酶(NOS)抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸(L-NNA)、一氧化氮前体L-精氨酸(L-AA)对Ghrelin和GHRP-6调控胃平滑肌运动的影响以阐明其机制;同时比较分析了Ghrelin和胃动素对胃窦部平滑肌收缩的协同作用。采用荧光免疫组化双染方法,观察了ghrelin在胃肌间神经丛的表达。
结果:不同频率电刺激胃底部肌间神经(1~16 H),平滑肌条呈现开电刺激( on-response)的舒张波和随后出现的关电刺激(off-response)收缩波,其中产生的on-response舒张效应可被L-NNA消除,而off-response诱导的收缩效应可被阿托品和胍乙啶阻断(NANC)。在胃底部,Ghrelin和GHRP-6可使on-response诱导的平滑肌舒张活动减弱,off-response诱导的肌条收缩活动增强,且Ghrelin作用明显强于GHRP-6。L-0NNA可显著增强Ghrelin和GHRP-6的促平滑肌收缩效应,但L-AA可显著减弱该作用。在胃窦部,电场刺激肌间神经,舒张波消失,仅出现断电刺激的收缩波。Ghrelin和GHRP-6均可使该收缩作用增强。Motilin与ghrelin对胃窦平滑肌舒缩的影响存在协同作用。免疫组化结果显示,在胃肌间神经丛内有大量ghrelin免疫阳性神经元的表达。
结论:开电刺激肌间神经产生的舒张波由非胆碱能非肾上腺素能神经介导,而随后产生的断电刺激收缩波可能与胆碱能神经介导有关。Ghrelin和GHRP-6均可通过肌间神经丛促进胃底部、胃窦部平滑肌收缩,该效应可能与一氧化氮通路有关。