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目的:探讨脉冲染料激光(Pulsed dye laser,PDL)对兔耳创面上皮细胞向间质细胞转化的影响及该现象对瘢痕形成的关系。方法:1、兔耳腹侧增生性瘢痕(Hypertrophic scar,HS)模型的建立:选取月龄大小在4-5月之间、不区分雌雄、公斤体重在2.4±0.20kg的健康成年家兔12只,兔耳腹侧面毛发在实验开始前刮除,常规消毒兔耳周围皮肤、铺巾,3%戊巴比妥钠(3%Ne mbutal,3ml/kg)耳缘静脉麻醉,在使用自研环形钻刀沿各兔耳腹侧长轴建立6个直径10mm,每个瘢痕间隔0.5cm,深达皮下软骨的皮层缺损创面(操作注意避开肉眼可见血管),共计144个。术后压迫止血,自由进食,金霉素眼膏抗感染、三天一次定期换药、观察伤口愈合、记录瘢痕形成情况。2、实验分组:建模后4周,16个瘢痕模型不符合选取标准,予以排除,剩余瘢痕兔耳左侧68个,右侧60个,共有128个创面愈合、脱痂,形成突出于正常皮肤的增生性瘢痕。按照兔耳瘢痕顺时针依次编号,然后按随机数字表法将各组瘢痕模型分成A/B/C/D 4组,每组32个瘢痕,A/B/C组作为治疗组(采用595nm脉冲染料激光进行治疗,治疗参数及模式分别为:波长595nm,光斑直径7mm,发射频率2Hz,脉宽20ms,能量密度12J/cm2,间隔时间及动态冷却时间均为20ms,每个瘢痕重复3次照射),A组每周进行1次PDL照射,B组每两周进行1次PDL照射,C组每3周进行1次PDL照射,共计8周,D组为对照组不予干预。3、大体观察:每次PDL治疗前后分别观察、记录各组HS组织色泽、质地、便携式超声测量瘢痕组织的厚度。4、组织学观察:8周PDL治疗结束后统一取材,4%多聚甲醛固定瘢痕团块,常规脱水、包埋,行HE染色、免疫组化检测各组TGF-β1、E-cadherin、Vimentin表达情况。5、统计学分析:数据的统计学处理采用SPSS 20.0统计软件包,计量资料用均值((?)±s)表示,在进行方差齐性检验和正态分布检验后,组间的比较采用单因素方差分析。检验水准α=0.05,P<0.05表示差异有统计学意义。结果:1、大体观察:建模术后经过不同周期PDL治疗,A、B组与同期C、D组相比瘢痕表面较为平坦,瘢痕色泽与正常兔耳腹侧肤色相似,质地柔软,C组和D组差异不明显。2、瘢痕厚度的测量:建模完成后各组均有瘢痕增生,但瘢痕厚度无明显差异(P>0.05);PDL治疗后4周开始,A、B治疗组瘢痕厚度显著小于同期D组(P<0.05);与对照组D比较,治疗组C的各瘢痕厚度无明显差异性(P>0.05)。3、HE染色:激光治疗A、B组中,瘢痕组织内胶原纤维排列稀疏,成纤维细胞、炎性细胞数量少,血管细小、排列均匀;在C组及对照组D组中,瘢痕真皮组织明显增生变厚,其内可见炎性细胞浸润,数量较多,排列紊乱旋涡样排列。4、SP免疫组化染色:A、B组中细胞因子TGF-β1、Vim的细胞面积、细胞数量较对照组D组明显减少(P<0.05);而细胞因子E-cad面积、细胞数量则较D组明显增多(P<0.05)。结论:1、脉冲染料激光可能通过干预上皮间充质转化的表达产生瘢痕抑制作用。2、治疗周期为两周较为适宜。