羊乳中乳酸菌的分离鉴定及其细菌多样性研究

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羊乳营养价值较高,富含蛋白质、脂肪、乳糖、矿物质以及多种维生素,同时羊乳也易被微生物污染,是微生物生长繁殖的天然培养基,因此,研究羊乳中微生物组成对控制羊乳质量具有重要的意义。本课题应用分子生物学技术研究羊乳中乳酸菌的组成及羊乳中细菌多样性,为控制羊乳的质量品质提供基础。(1)羊乳中乳酸菌组成。通过对71份样品进行表型鉴定和16S rRNA基因鉴定,发现羊乳中乳酸菌含量较低,占细菌含量0.39%~9.75%;对分离纯化的77株乳酸菌通过16S rRNA基因鉴定,发现羊乳中乳酸菌主要由E.hirae(80.5%)、E.faecalis(10.4%)、W.cibaria(3.9%)、L.lactis(2.6%)、E.faecium(1.3%)和 L.garvieae(1.3%)组成,其中E.hirae为羊乳中优势乳酸菌。(2)羊乳中的细菌多样性分析。通过对羊乳提取宏基因组后进行基因测序,分析羊乳中细菌多样性。结果显示,羊乳中细菌门有27种,含量超过1.0%的细菌门有 Firmicutes、Bacteroidetes Proteocteria、;细菌属有 354 种,含量超过 1.0%的细菌属有 Massilia、Staphylococcus、Enterobacter、Acinetobacter、Stenotrophomonas、Pseudomonas、Bacillus;细菌种有826种,含量超过1.0%的细菌种有B.anthracis、P.geniculata、A.johnsonii、P.aeruginos。不同地区羊乳中微生物分布有一定的差别,其中杨凌地区特有的细菌有Cellulosilyticum、Aminobacterium、Lutispora、Aminivibrio、Prevotella、Longilinea Epulopiscium等属;宝鸡地区特有的细菌属有Oscillospira、Rhodovulum、Mesoflavibacter、Prevotellaceae、Acetitomaculum、Halobacteriovorax、Alsobacter、Haglobus和Legionella 等属;渭南地区特有的细菌属有Bergeyella、C.Nitrosopelagicus、Anaerofustis、Neptuniibacter、Lachnoclostridium和C.Soleaferrea 等属。(3)羊乳中有益菌和有害菌的分析。通过对羊乳中有益菌和有害菌组成分析,发现羊乳中有益菌包括主要有Weissella、S.thermophilus、Lactococcus、Lactobacillus和Enterococcus 有害菌属主要有Prevotellaceae、Treponema、Erysipelothrix、Serratia、Acinetobacter、Enterobacter、Staphylococcus、Prevotella、Rhodococcus、Oligella、Halomonas、Stenotrophomonas、Oscillospira、Aeromonas、Fusobacterium、Moraxella、Brachyspira、Haemophilus 和 Myroides,有害菌种主要有 S.multivorum、C.perfringens、B.aalborgi、C.tertium、F.necrophorum、E.Shigella、B.anthraci、F.nucleatum 和A.viridans。此外,羊乳中还有一些嗜冷菌,如细菌属Alcaligenes、Psychrobacter;细菌种有P.geniculata、P.psychrotolerans、P.aeruginos、P.celer、P.alimentarius、等。
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