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RNA干扰(RNA interfering，RNAi)现象是生物界近十年来最令人兴奋的发现。它很快成为分子生物学中最有力而且必不可少的工具。RNAi是动植物体内的一种序列特异性的、转录后基因沉默的过程，启动这个过程的双链(double-stranded，ds)RNA与被沉默基因在序列上是同源的，并在多种有机体中成为沉默基因表达的有力工具。RNA干扰是一种进化上保守的过程，动植物利用小的双链RNA以序列特异性的方式降解目标RNA，从而保护自身基因组。转录后基因沉默可以导致细胞和病毒的RNA降解。近来已有实验证明：21-25个核苷酸的双链siRNA可以转染相关的细胞并抑制特异的RNA。人们可以利用这种方法来抑制HIV-1对人类细胞的感染。在哺乳动物细胞中，19-25个核苷酸长短的双链siRNA(small interfering RNA)可有效地抑制基因表达。在这里，我们利用pBS/H1SP载体，它表达的双链RNA的转录产物可以用来抑制特异性HIV-1基因的表达。在siRNA实验中，为了比较由H1启动子转录的siRNA在细胞内的作用，我们使用以绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的载体-pEGFP-C1质粒，在荧光显微镜下，很容易地看到EGFP在细胞中表达。分别针对HIV-1基因组上不同位点siRNA表达载体与表达相应EGFP-HIV融合基因的质粒共转染293，结果表明和对照质控载体相比，转染了pHIV-siRNA质粒的细胞中的EGFP-HIV的表达得到显著抑制。通过该途径，我们成功地筛选出能抑制HIV-1基因表达的有效siRNA。此外，我们还研究了在同一载体上表达两种siRNA，分别针对不同的HIV基因，获得了良好的抑制效果。