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目的： CD47 RNAi重组腺病毒在体感染大鼠心肌细胞，研究CD47低表达调控eNOS/NO信号通路减轻缺血再灌注(I/R)损伤的心肌保护作用，并探讨其分子机制，为治疗心肌缺血再灌注损伤(MIRI)提供理论依据。 方法: 本实验采用雄性SPF级SD大鼠(体重220-250g)共40只，将其随机分为4组(n=10)： (1)生理盐水+假手术(Sham组)； (2)生理盐水+IR(I/R组）； (3)Ad-EGFP-CD47 RNAi+I/R组(Ad-E-C组)； (4)Ad-EGFP-NC RNAi+I/R(Ad-E-N组)。将构建的携带CD47 RNAi重组腺病毒载体(Ad-EGFP-CD47 RNAi)、非沉默RNAi重组腺病毒载体(Ad-EGFP-NC RNAi)或等量生理盐水分别多点注射大鼠心肌，稳定感染3天后结扎冠状动脉左前降支30min后，松解灌注3h，构建大鼠MIRI模型。处死大鼠，取心肌、血液标本做进一步检测。免疫荧光观察重组腺病毒感染大鼠心肌后腺病毒的感染和CD47在心肌细胞的表达情况；全自动血生化分析仪测定血清心肌酶LDH、CK和CK-MB的释放水平；TTC染色法检测大鼠心肌梗死面积；HE染色观察大鼠心肌组织形态；qRT-PCR、Western blot分别检测CD47mRNA、蛋白的表达，Western blot检测eNOS、p-eNOS和gp91phox蛋白水平，相关试剂盒检测eNOS、MDA、SOD的活性及心肌中NO、超氧阴离子的水平。 结果： (1)重组腺病毒载体成功感染心肌组织，并且CD47 RNAi成功降低了心肌细胞CD47的表达水平。 (2)与Sham组相比，I/R组血清心肌酶LDH、CK和CK-MB的释放水平显著升高(P<0.05)，Ad-E-C组的血清LDH、CK和CK-MB的释放水平较I/R组或Ad-E-N组明显下降(P<0.05)。 (3)Ad-E-C组心肌梗死面积较I/R组或Ad-E-N组明显减少(P<0.05)。 (4)与Sham组相比，I/R组可见明显的细胞变性、细胞坏死等病理改变；Ad-E-C组心肌细胞变性、细胞坏死等病理改变较I/R组或Ad-E-N组得到改善。 (5)与Sham组相比，I/R组心肌组织的促氧化应激指标超氧阴离子生成、MDA的活性以及gp91phox表达水平显著升高(P<0.05)，而抑制氧化应激指标SOD的活性则显著降低(P<0.05)。Ad-E-C组的超氧阴离子生成、MDA的活性以及 gp91phox表达水平较I/R组或Ad-E-N组明显下降(P<0.05)，而SOD的活性则显著升高(P<0.05)。 (6)Sham组、I/R组、Ad-E-N组、Ad-E-C组之间eNOS蛋白的表达水平并无明显的差异(P＞0.05)，与Sham组相比，I/R组磷酸化eNOS（p-eNOS）、eNOS活性以及NO的水平显著降低(P<0.05)；Ad-E-C组的p-eNOS、eNOS活性以及NO的水平较I/R组或Ad-E-N组明显上调(P<0.05)。 结论： (1)CD47通过抑制下游eNOS/NO信号通路在MIRI的发病机制中起到了重要的推动作用，参与缺血再灌注心肌细胞的氧化应激损伤过程。 (2)通过腺病毒感染和RNA干扰技术的方式，降低CD47在心肌细胞中的表达水平，可减少对NO生成的抑制作用，抑制氧化应激损伤、减轻心肌梗死情况、减少心肌酶释放，来缓解大鼠心肌缺血再灌注损伤。 (3)CD47作为干预MIRI的有效靶点，结合基因治疗有望在不久将来成为治疗MIRI的有效措施，为冠心病患者血运重建中MIRI的防治提供理论依据。