1,25-二羟维生素D<,3>抗STZ诱导大鼠胰岛细胞损伤的作用机理研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kamomoo
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目的: 研究和探讨 1,25-(OH)2D3对于 STZ 诱导的大鼠离体胰岛细胞损伤的影响及其可能的作用机制。 方法: 分离 Wistar 新生鼠胰岛细胞,体外培养成功后,分为以下 5 组:正常对照组:培养液中不加入任何干预因素。1,25-(OH)2D3组:单纯加入终浓度 10-6 M 的 1,25-(OH)2D3。STZ 组:培养细胞中加入终浓度为 2.2mM 的 STZ,作用 30 分钟后洗去 STZ 再培养 36 小时。低浓度(10- 8 M)1,25-(OH)2D3保护组和高浓度 1,25-(OH)2D3(10-6 M)保护组:分别在培养的胰岛细胞中加入 10- 8 M 和 10-6 M 两种不同终浓度的 1,25-(OH)2D3,作用 30 分钟后再加入 STZ 共同作用 30 分钟,洗去作用物,经过 36 小时的恢复期孵育。各组进行以下各项指标检测。放射免疫法检测培养液中胰岛素含量、电镜观察细胞凋亡形态、TUNEL 法计数细胞凋亡率、RT-PCR 法检测胰岛细胞抗凋亡蛋白 A20 的 mRNA 表达。 结果: 1,25-(OH)2D3 组与正常对照组比较,胰岛素水平未见明显变化,细胞凋亡率无显著性差别(P>0.05)。STZ 组与正常对照组相比胰岛素水平显著降低,电镜观察到凋亡细胞,TUNEL 法定量凋亡率达(25.36± 2.37)%,与正常对照组之间比较 P<0.01;而在 STZ 作用前加入不同浓度 1,25-(OH)2D3 作预处理的两个保护组,胰岛素分泌
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