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尿素柱层析技术是依据尿素包合法及柱层析技术的原理,综合二者优势,组合出的一种可用来分离各种具有链状分子结构物质的新型方法。本文将其应用于α-亚麻酸乙酯的分离研究,考察对分离效果的主要影响因素;而后利用生物酶催化反应将一些具有特殊功能的脂肪酸引入磷脂中,制备功能性磷脂产品。
(1)负载型尿素柱层析分离α-亚麻酸乙酯过程中残留甲醇量对分离效果的研究表明:在尿素与硅胶载体比例为2:3时,固定相中残留6-12%甲醇时对于饱和及单不饱和脂肪酸有较好的包合效果,可得到纯度超过85%的α-亚麻酸乙酯;残留甲醇量低于3%时,负载型尿素对于饱和脂肪酸乙酯的包合作用减弱甚至消失,反而是空间位阻小的饱和及单不饱和脂肪酸先洗脱;残留甲醇量高于12%时,负载型尿素对于含量较高的油酸乙酯包合作用逐渐减弱,导致洗脱液中α-亚麻酸乙酯含量降低。
(2)尿素柱层析分离α-亚麻酸乙酯的研究表明:固定相中尿素与硅胶最佳质量比为2:3,以紫苏油乙酯为原料,60-80目硅胶为柱层层析载体,无水甲醇为负载尿素的结晶溶剂,石油醚为流动相,层析柱规格为φ2cmx60cm,进样量为7mL,洗脱液流速范围为1mL/min~1.5mL/min,可得到纯度85.55%的α-亚麻酸乙酯,收率81%。
(3)尿素柱层析技术的研究表明:在尿素柱层析分离混合脂肪酸乙酯的过程中,主要存在两种分离机理,即空间位阻作用与尿素包合作用,据此可将该技术应用于更广泛的领域。
(4)特殊脂肪酸组成磷脂的制备表明:可以通过酶催化磷脂与亚麻油或紫苏油反应,调整磷脂各脂肪酸含量达到人体所需摄入的比例,制备成脂肪酸比例协调磷脂;通过酶催化卵磷脂与元宝枫油反应,制备磷脂型神经酸,解决了神经酸难溶于水,不易吸收的难题,同时兼具神经酸与磷脂双重生理功能。